植物內(nèi)生菌綠色木霉(Trichoderma viride)對(duì)油菜菌核病的生物防治.pdf

1、油菜菌核病是一種世界性病害，在五大洲的100多個(gè)國家皆有發(fā)生，其地理分布極為廣泛。它是由核盤菌(Sclerotinia sclerotiorum)引起的一種真菌病害。在中國，油菜菌核病居油菜三大病害之首，一般發(fā)病率為10％～30％，嚴(yán)重時(shí)可以達(dá)到80％以上。在長江中、下游及東南沿海一些主要的油菜產(chǎn)區(qū)，包括江蘇、安徽、上海、湖南、浙江、江西、湖北等地病害的發(fā)生尤為突出，嚴(yán)重影響了我國的油菜生產(chǎn)。
　　 本實(shí)驗(yàn)從千年古銀杏樹、茶樹以

2、及紅豆樹的根、莖、葉內(nèi)分離內(nèi)生真菌和根際土壤中分離真菌，篩選出對(duì)油菜菌核病有拮抗作用的生防真菌；通過室內(nèi)拮抗、孢子萌發(fā)等試驗(yàn)及定殖、缽栽、田間防病實(shí)驗(yàn)，探明拮抗真菌對(duì)油菜菌核病的生防潛能，取得以下研究結(jié)果。
　　 1、生防真菌的分離、篩選和鑒定
　　 對(duì)從四川省雅安市采集的銀杏樹、茶樹以及紅豆樹等3種植物的根、莖、葉內(nèi)生真菌和根際土壤種分離真菌，共分離得到內(nèi)生真菌73株、根際土壤真菌29株；通過對(duì)油菜菌核病菌的拮抗試驗(yàn)，

3、篩選出有較強(qiáng)拮抗作用的紅豆樹內(nèi)生真菌1株。通過形態(tài)鑒定，將該內(nèi)生真菌鑒定為綠色木霉（Tichoderma viride）。
　　 2、綠色木霉（T. vir ide）對(duì)油菜菌核病菌的拮抗作用和對(duì)子囊孢子萌發(fā)的影響
　　 利用綠色木霉（T. viride，HJZ3）菌株的發(fā)酵液抑制油菜菌核病菌菌絲生長的實(shí)驗(yàn)，測(cè)定抑制率達(dá)到90％以上；采用發(fā)酵液浸泡菌核和發(fā)酵液加入PDA平板兩種試驗(yàn)方法，測(cè)定HJZ3對(duì)油菜菌核萌發(fā)的抑制率，

4、發(fā)酵液稀釋2倍時(shí)，對(duì)油菜菌核病菌菌核萌的抑制率分別為66％，60％；在稀釋5倍時(shí)，對(duì)菌核萌發(fā)的抑制作用相比較稀釋2倍時(shí)有所下降，抑菌率分別降低為30％，34％。HJZ3發(fā)酵液在稀釋2倍，5倍，10倍時(shí)，菌核病菌子囊孢子的萌發(fā)率分別為58.3％，85.8％，90.4％，HJZ3菌株在稀釋2倍，5倍，10倍時(shí)孢子的萌發(fā)率分別為6.9％，23.1％，53.6％。
　　 3、綠色木霉（T. viride）在油菜體內(nèi)的定殖
　　

5、通過藥物鏈霉素標(biāo)記綠色木霉（T. viride），在油菜植株根際土壤及油菜植株體內(nèi)的定殖能力進(jìn)行測(cè)定。試驗(yàn)結(jié)果證明：HJZ3能夠較好的在油菜植株根際及體內(nèi)定殖，菌株直接灌根處理接種后的第3d，在苗根部分離到的菌量達(dá)204cfu/mg，顯著高于莖和葉，說明菌株易進(jìn)入油菜苗體內(nèi)。并且于接菌后3、5、8、11、15d隨機(jī)取5株油菜苗進(jìn)行標(biāo)記菌的分離，試驗(yàn)證明，標(biāo)記的HJZ3菌株可在油菜根際土中及其定殖。
　　 4、綠色木霉（T. vi

6、ride）對(duì)油菜的生長的影響
　　 拮抗菌液浸種對(duì)油菜種子的出苗率、植株生長有顯著的促進(jìn)作用。其中，接種的種子出苗率較未接種的對(duì)照提高了2.29(P＜0.05)，并且出苗整齊、迅速；植株株高、干物質(zhì)重量均明顯高于清水對(duì)照，差異達(dá)到了顯著水平(P＜0.05)或極顯著水平(P＜0.01)。
　　 5、綠色木霉( T. viride)對(duì)油菜菌核病的室內(nèi)及田間控病效果
　　 進(jìn)行室內(nèi)盆栽試驗(yàn)，對(duì)照病斑大小為23.4mm，

7、供試的兩種化學(xué)藥劑及生防菌液的處理病斑大小均在5～10mm之間，對(duì)比試驗(yàn)結(jié)果，篩選出的拮抗真菌對(duì)油菜菌核病確實(shí)有明顯的抑制作用；在田間試驗(yàn)中，統(tǒng)計(jì)油菜菌核病的田間病株率，對(duì)照高達(dá)94.2％，兩種化學(xué)藥劑及生防菌液的處理均在50％～60％之間，對(duì)照的病情指數(shù)為71.7％，生防菌液為17.5％.兩種化學(xué)藥劑和生防菌液的田間防效均在65％～70％，但是生防菌液處理與之前室內(nèi)盆栽試驗(yàn)的抗病效果有了一定的差異，這可能與復(fù)雜多變的自然環(huán)境的影響有關(guān)