有機磷農(nóng)藥快速檢測試紙的初步研究.pdf

1、目的：依據(jù)酶抑制原理建立有機磷（Organicphosphorus，OP）農(nóng)藥殘留快速檢測方法，制備快速檢測試紙，建立用于普通民眾日常檢測水果、蔬菜中的微量農(nóng)藥殘留，以及為農(nóng)田、市場現(xiàn)場快速檢測農(nóng)藥含量的方法。為今后進一步開發(fā)和利用膽堿酯酶檢測OP農(nóng)藥殘留污染打下良好的基礎，提供理論依據(jù)。方法：采用硫酸銨沉淀法，普魯卡因胺（Procainamide）-ECH瓊脂糖4B親和層析純化膽堿酯酶。以殼聚糖膜為載體，采用戊二醛交聯(lián)法固定膽堿酯酶，

2、制備膽堿酯酶試紙。設計正交試驗考察牛血清白蛋白（Bovineserumalbumin，BSA）百分含量，戊二醛（Glutaraldehyde，GA）濃度，BSA％與GA濃度二者間的交互作用及固定化所采用何種載體材料等因素對固定化的影響，確定固定化條件。對膽堿酯酶試紙進行靈敏度和差異性分析。結果：各條件對固定化的影響大小依次為：固定化載體>戊二醛濃度>戊二醛xBSA>BSA濃度。在5.3×10-3-5.3μg/L幾范圍內，膽堿酯酶抑制率與

3、敵敵畏質量濃度的回歸方程為y=12.799Ln（x）+72.384（R=0.9724），最低檢出濃度為0.17μg/L。固定化酶在15天內活力保持穩(wěn)定。結論：分離、純化膽堿酯酶采用條件：緩沖為含0.5％TritonX-100，20mmol/L（pH7.0）的磷酸緩沖，用40％硫酸銨沉淀。固定化采用條件：殼聚糖膜載體，0.01％戊二醛，2％牛血清白蛋白，0.05mol/L（pH6.0）磷酸緩沖液。通過對膽堿酯酶分離、純化及固定化條件的研究