菌株HD-NK413抗菌物質(zhì)的純化及抗馬鈴薯早疫病機(jī)理研究.pdf

1、馬鈴薯是世界上繼水稻、小麥和玉米之后的第四大糧食作物，但近年來(lái)馬鈴薯早疫病發(fā)生頻繁，造成相當(dāng)大的危害。小白鏈霉菌菌株HD-NK413對(duì)馬鈴薯早疫病菌具有較好的抗菌活性，本試驗(yàn)主要對(duì)該菌產(chǎn)生的抗菌物質(zhì)進(jìn)行初步分離，并研究其對(duì)馬鈴薯早疫病菌的抗菌機(jī)理。
　　 用薄層層析法分析發(fā)酵液中的有效成分，通過活性炭吸附、硅膠柱層析的方法對(duì)HD-NK413的發(fā)酵液中的活性組分進(jìn)行了分離純化。確定了活性炭吸附的最佳條件為靜態(tài)吸附12h，pH值自然

2、，活性炭顆粒用量與發(fā)酵液體積比為1∶1；采用4倍于活性炭體積的pH6的50％丙酮溶液對(duì)吸附有抗菌活性物質(zhì)的活性炭進(jìn)行洗脫，得到的洗脫液的抗菌活性最高。對(duì)50％丙酮洗脫液濃縮后，進(jìn)行了硅膠柱層析分離，得到了3個(gè)分離峰，其中兩個(gè)是具有抑菌活性的單一組分，在GF254硅膠板上的遷移率分別為0.83、0.86，分別在272和271nm處有紫外吸收峰，符合核苷類抗生素的紫外吸收特征。
　　 利用分離到的HD-NK413抗生素粗品研究了對(duì)馬

3、鈴薯早疫病菌的抗菌機(jī)制，明確了其對(duì)病原菌菌絲體的抑制作用和殺死作用。菌絲生長(zhǎng)抑制試驗(yàn)結(jié)果表明，抗生素粗品處理的病菌菌絲末端出現(xiàn)了膨脹泡，生長(zhǎng)畸形，菌絲多較為短小，菌絲隔膜模糊不清，甚至消失。菌絲殺死試驗(yàn)結(jié)果表明，用抗生素粗品處理正常生長(zhǎng)的菌絲20h后，多數(shù)菌絲體消融，余下的少數(shù)菌絲的細(xì)胞壁也變得模糊，原生質(zhì)皺縮，細(xì)胞結(jié)構(gòu)受到了嚴(yán)重破壞。
　　 對(duì)抗生素粗品處理的病原菌菌絲體的生理指標(biāo)測(cè)定結(jié)果表明，該抗生素能夠增大病菌細(xì)胞膜的滲透