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1、對本實驗室自主分離獲得的茄子黃萎病生防內(nèi)生性枯草芽孢桿菌29-12的發(fā)酵條件,通過培養(yǎng)條件優(yōu)化及正交試驗得出最佳培養(yǎng)基配方為:玉米粉15g/L,山芋淀粉5g/L,豆粕粉15 g/L,蛋白胨8 g/L,MgSO4 0.01%,K2HPO4 0.05%。最佳培養(yǎng)條件為:起始pH值7.5、250 mL,三角瓶裝液量100 mL、搖瓶速度120r/min、接種量10%、溫度30℃。在此條件下培養(yǎng)菌株29-12 84 h,抑菌圈大小為2.12 c
2、m,菌量為1.58×109cfu/mL,芽孢得率為100%。 另外,通過硫酸銨沉淀、Sephadex G 25分子篩層析、DEAE-52離子交換層析、FPLC等手段,純化菌株29-12產(chǎn)生的胞外抗菌活性物質(zhì)。結(jié)果表明硫酸銨飽和度為40%-50%和50%-60%提取的物質(zhì)具有較強的抑菌活性,說明該抗菌物質(zhì)在硫酸銨飽和度為40%-60%時就可完全沉淀。利用Sephadex G 25分子篩層析后獲得2個主峰,其中峰Ⅰ具有活性,將峰Ⅰ的
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