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文檔簡介
1、本試驗(yàn)主要研究了由產(chǎn)氣莢膜梭菌引起的雛雞腸炎以及使用地衣芽孢桿菌預(yù)防治療雛雞腸炎回腸組織學(xué)變化和采用實(shí)時熒光定量PCR檢測IFN-α,IFN-γ,IL-1β,IL-6四種炎性細(xì)胞因子在雞腸道組織中的表達(dá)量變化。
本實(shí)驗(yàn)選擇產(chǎn)氣莢膜梭菌標(biāo)CVCC2030作為病原菌,選擇從健康雞腸道分離的一株地衣芽孢桿菌作為實(shí)驗(yàn)菌株;實(shí)驗(yàn)動物為健康一日齡鐵腳麻雞,分為感染試驗(yàn)和芽孢桿菌防治試驗(yàn)。感染試驗(yàn),一日齡健康雞60羽,隨機(jī)分為空白組,感
2、染組,每組30只。感染組15日齡灌喂球蟲(100萬個/ml,1ml),17-20日齡灌喂Cp(產(chǎn)氣莢膜梭菌)(108CFU/1mL,d),空白組喂相同劑量生理鹽水。芽孢桿菌防治試驗(yàn),選取一日齡健康雞150羽,隨機(jī)分為空白組(K組),感染組(G組),預(yù)防組(y組),治療組(Z組),空白組和感染組每組30只,預(yù)防組根據(jù)添加菌粉Ⅰ劑量不同分為0.05%,0.1%和0.2%三組;治療組添加不同劑量菌粉Ⅱ分為0.1%,0.2%,0.4%三組,每組
3、15只??瞻捉M與感染組飼喂基礎(chǔ)日糧,預(yù)防組飼喂添加不同劑量菌粉Ⅰ的基礎(chǔ)日糧,治療組1至20日齡飼喂添加0.05%菌粉Ⅰ的基礎(chǔ)日糧,20日齡后飼喂添加不同劑量菌粉Ⅱ的基礎(chǔ)日糧。感染組,預(yù)防組,治療組15日齡灌喂球蟲(100萬/ml,1ml),17-20日齡灌喂Cp(108,1mL)致雞腸炎,空白組喂相同劑量生理鹽水。試驗(yàn)表明:
1.外周血白細(xì)胞數(shù)變化:感染組白細(xì)胞數(shù)高于空白、預(yù)防和治療三組,且差異極顯著(P<0.01)或顯著
4、(P<0.05);預(yù)防組白細(xì)胞數(shù)量高于空白組,但低于感染組;治療組與空白組差異不顯著(P>0.05);預(yù)防組0.1%,治療組0.4%各時間段白細(xì)胞數(shù)與空白組最接近,且都在正常范圍內(nèi),而感染組21到25日齡白細(xì)胞數(shù)都高出了正常范圍。
2.回腸產(chǎn)氣莢膜梭菌菌數(shù)變化:攻毒前各組雞回腸中產(chǎn)氣莢膜梭菌的數(shù)量差異不顯著(P>0.05),攻毒后感染組高于其他組,差異極顯著(P<0.01),預(yù)防組回腸產(chǎn)氣莢膜梭菌數(shù)高于空白組差異極顯著(P
5、<0.01)但低于感染組差異極顯著(P<0.01),隨著益生菌劑量增大Cp的數(shù)量減少,但不顯著(P>0.05)。治療組益生菌有效抑制了外源產(chǎn)氣莢膜梭菌在回腸的定植,Cp數(shù)量低于感染組,差異極顯著(P<0.01)與空白組數(shù)量差異不顯著(P>0.05)。
3.回腸組織細(xì)胞因子表達(dá)量變化:產(chǎn)氣莢膜梭菌感染前雛雞14日齡時,各組IFN-α,IFN-γ,IL-1β,IL-6表達(dá)差異不顯著(P>0.05);21日齡時感染組IFN-γ,
6、IL-1β表達(dá)水平顯著高于空白組(P<0.01),IFN-α,IL-6水平略高于空白組但I(xiàn)FN-α差異不顯著(P>0.05):23日齡時感染組IFN-γ,IL-1β,IL-6水平高于空白組,差異極顯著(P<0.01),IFN-α水平差異不顯著(P>0.05);25日齡時,感染組只有IFN-γ水平高于空白組,差異顯著(P<0.05),其他因子略有差異,但差異不顯著(P>0.05);28日齡時四種細(xì)胞因子的表達(dá)水平兩組都無顯著差異(P>0.
7、05)。用芽孢桿菌預(yù)防治療時,14日齡空白組,感染組,預(yù)防組細(xì)胞因子表達(dá)無差異(P>0.05):21日齡預(yù)防組IL-1β,IFN-γ,IL-6高于空白組,差異顯著(P<0.05),IL-1β低于感染組差異極顯著(P<0.01),其他因子與感染組差異不顯著(P>0.05);23日齡預(yù)防組IL-1β回復(fù)到正常水平,IFN-γ,IL-6略低于感染組,差異不顯著(P>0.05);28日齡時所有組細(xì)胞因子和空白組都無顯著差異(P>0.05)。治療
8、組IL-1β,IFN-γ,IL-6表達(dá)量總體上都低于感染組,23日齡顯著(P<0.01),但高于空白組(IL-1β、IL-6P<0.05,IFN-γP<0.01):25日齡時表達(dá)量低于感染組差異顯著(P<0.05),與空白組無顯著差異(P>0.05),28日齡三組中4種因子表達(dá)量都無顯著差異(P>0.05),IFN-α表達(dá)量變化無明顯規(guī)律性,與空白組差異不顯著。
4.回腸絨毛組織學(xué)結(jié)構(gòu)變化:空白組雞回腸腸絨毛完整,無出血或
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