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文檔簡介
1、鵝腸道微生物種群是一個(gè)非常復(fù)雜的微生態(tài)環(huán)境,對(duì)鵝的消化吸收及健康起著重要作用。本研究以揚(yáng)州鵝為試驗(yàn)材料,采用PCR-DGGE技術(shù)研究不同形態(tài)玉米日糧及日齡對(duì)鵝腸道微生物區(qū)系的影響。選用7日齡揚(yáng)州鵝192只,隨機(jī)分成4組,每組4個(gè)重復(fù),每個(gè)重復(fù)12只,F(xiàn)組全程飼喂粉狀玉米日糧;F-L組8~28日齡飼喂粉狀玉米日糧,29~84日齡飼喂整粒玉米日糧;L-F組8~28日齡飼喂整粒玉米日糧,29~84日齡飼喂粉狀玉米日糧;L組全程飼喂整粒玉米日糧
2、;四個(gè)處理組的營養(yǎng)水平一致。在28、49、70、84日齡時(shí)采集腸道內(nèi)容物進(jìn)行基因組總DNA的提取,利用細(xì)菌通用引物對(duì)細(xì)菌16S rRNA的V3區(qū)和V6-V8區(qū)進(jìn)行PCR擴(kuò)增,采用45%~60%的變性劑濃度范圍對(duì)擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行DGGE,結(jié)合特異性和共性條帶切膠回收DNA進(jìn)行克隆測序并利用定量分析技術(shù),分析比較了鵝腸道內(nèi)容物菌群組成和細(xì)菌數(shù)量在28、49、70日齡這三個(gè)日齡的差異。另外,研究不同形態(tài)玉米日糧對(duì)84日齡揚(yáng)州鵝腸道微生物區(qū)系的影響
3、。結(jié)果顯示:
⑴飼養(yǎng)后期鵝的腸道微生物區(qū)系受到飼養(yǎng)前期玉米形態(tài)的影響。
⑵整粒玉米日糧導(dǎo)致空腸菌群種類的下降和回腸細(xì)菌種類的增加,對(duì)十二指腸和盲腸微生物區(qū)系影響較小。即玉米日糧形態(tài)能夠影響鵝腸道微生物菌群分布,其中,對(duì)空腸和回腸影響較大,對(duì)直腸的影響次之,對(duì)十二指腸和盲腸影響較小。推斷整粒玉米日糧影響鵝腸道微生物區(qū)系可能歸咎于整粒玉米日糧增加了食糜在消化道總的停留時(shí)間。
⑶飼喂整粒玉米日糧組的鵝
4、腸道菌群種類減少,整粒玉米組鵝腸道細(xì)菌數(shù)量增加,即整粒玉米日糧能夠減少鵝腸道菌群種類,提高細(xì)菌數(shù)量。
⑷隨著日齡的增加,鵝腸道菌群種類減少,細(xì)菌數(shù)量的變化趨勢是由低到高再到低的動(dòng)態(tài)變化過程,即鵝腸道微生物的發(fā)育是一個(gè)動(dòng)態(tài)變化過程。
⑸各腸道所有樣品在PCR-DGGE圖譜中主要優(yōu)勢條帶都超過10條,其中盲腸的條帶最多,加上亮度較低的條帶,說明鵝腸道細(xì)菌種群結(jié)構(gòu)和多樣性非常豐富,腸道內(nèi)含有如此豐富菌群是潛在的寶貴
5、資源。
⑹分離所得的揚(yáng)州鵝腸道優(yōu)勢菌條帶序列比對(duì)與如下菌種同源性較高(達(dá)94%~100%):鴿腸球菌,鏈球菌,羅氏菌,金黃色葡萄球菌亞種,另外主要還是目前不可培養(yǎng)的菌種,這些高同源性的未知菌很可能是細(xì)菌種群中的新屬或者新種,有待于以后進(jìn)一步的研究。
⑺PCR-DGGE能夠定性描述鵝腸道細(xì)菌種類的變化,是研究鵝腸道微生物多樣性的一項(xiàng)非常有效的技術(shù)。但鑒于DGGE只能檢測到優(yōu)勢菌群以及自身存在一定局限性,因此在以
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