玉米熱激轉(zhuǎn)錄因子基因HSFs和熱激蛋白基因HSP70s的特性研究.pdf

1、熱激轉(zhuǎn)錄因子(HSF)是生物體在熱激或其他脅迫條件下基因轉(zhuǎn)錄激活信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路中的重要成員,直接啟動(dòng)下游熱激蛋白(HSP)基因的表達(dá),在調(diào)節(jié)HSP基因表達(dá)和傳遞逆境脅迫尤其是熱脅迫信息及提高植物耐逆性等方面起著重要作用。為了獲得作物耐熱性轉(zhuǎn)基因育種所需的強(qiáng)效基因,本文以玉米H21為試材,通過(guò)分子生物學(xué)技術(shù),首先克隆了HSFs和HSP70s基因,通過(guò)序列比對(duì)分析其同源性,進(jìn)而篩選出與熱脅迫相關(guān)的基因；在此基礎(chǔ)上,研究了不同逆境脅迫處理對(duì)基因

2、表達(dá)的影響,初步探討了基因在逆境脅迫中的可能功能。通過(guò)試驗(yàn),獲得以下結(jié)果:
　　 利用RT—PCR方法,從玉米幼苗葉片中克隆獲得3個(gè)HSFs基因,研究結(jié)果表明,其中一個(gè)明顯受熱脅迫誘導(dǎo)表達(dá)。該HSF基因全長(zhǎng)1404bp,編碼467個(gè)氨基酸,命名為ZmHSF。半定量RT—PCR的結(jié)果顯示,熱、冷、鹽、干旱脅迫以及外源ABA處理均能顯著誘導(dǎo)基因的表達(dá)。表明多種環(huán)境刺激都能使ZmHSF基因的表達(dá)量增加,這為植物對(duì)環(huán)境刺激的交叉適應(yīng)提供

3、新的依據(jù)。
　　 同樣的方法,從玉米幼苗葉片中克隆獲得3個(gè)HSP70s基因,其中一個(gè)明顯受熱誘導(dǎo)表達(dá)。該基因全長(zhǎng)1737 bp,編碼578個(gè)氨基酸,命名為ZmHSP70。氨基酸序列比對(duì)分析表明,ZmHSP70與高粱中一個(gè)推測(cè)的蛋白(SbHSP70,XP_002465635)同源性最高,達(dá)95％,與水稻中一個(gè)推測(cè)的蛋白(OsHSP70,EAY89062)同源性達(dá)87％。半定量RT—PCR的結(jié)果顯示,42℃熱激和4℃冷脅迫均能提高Z