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文檔簡介
1、T-2毒素是污染我國飼料的主要霉菌毒素,動物飼喂污染的飼料后會導(dǎo)致造血組織和免疫器官損傷、引起出血性綜合癥、出現(xiàn)白細(xì)胞減少、貧血、胃腸道功能紊亂等癥狀,因此,T-2毒素對畜禽健康和畜牧業(yè)生產(chǎn)的危害很大。
為了探討T-2毒素對家畜的毒性機(jī)理及誘導(dǎo)凋亡的分子機(jī)制,首先采用T-2毒素對豬的肝臟細(xì)胞進(jìn)行暴露,暴露濃度為0、0.02、0.05、0.1 mg/L,暴露時(shí)間為48小時(shí),然后用基因芯片技術(shù)檢測0.05mg/L處理組基因表達(dá)
2、譜的變化。最后運(yùn)用熒光定量PCR檢測兩個(gè)關(guān)于藥物代謝的細(xì)胞色素P450家族的CYP2D25和CYP51的基因表達(dá)情況驗(yàn)證基因芯片的結(jié)果。結(jié)果表明,氧化應(yīng)激和細(xì)胞凋亡相關(guān)基因發(fā)生上調(diào),藥物、脂質(zhì)代謝和細(xì)胞生長的基因發(fā)生下調(diào)。0.05mg/LT-2毒素暴露48h的豬肝細(xì)胞與對照組的豬肝細(xì)胞相比,共有262個(gè)基因上調(diào),231個(gè)基因下調(diào)。其中HSP90和HSP70類似蛋白的基因(應(yīng)激相關(guān)基因)上調(diào),caspase1、caspase15(凋亡相關(guān)
3、基因)也上調(diào);另一方面,3β羥基類固醇脫氫酶(脂質(zhì)代謝)和細(xì)胞色素P450家族的CYP2D25和CYP51(藥物代謝)基因發(fā)生下調(diào),cyclin D1、D2(細(xì)胞生長)相關(guān)基因表達(dá)也下調(diào)。
為了進(jìn)一步探討T2毒素對細(xì)胞毒性的影響,改用T-2毒素對SW1353細(xì)胞進(jìn)行暴露,進(jìn)行MTT檢測細(xì)胞活性,熒光定量PCR檢測P53、bcl2、bax的基因差異情況,結(jié)果表明T-2毒素能夠明顯抑制SW1353細(xì)胞活性,上調(diào)P53、bax的
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