紅陽獼猴桃四倍體誘導(dǎo)及其抗?jié)儾√匦猿跆?pdf

1、獼猴桃是獼猴桃科(Actinidiacea)獼猴桃屬(Actinidia)落葉藤本果樹。我國是獼猴桃的主要起源中心,種質(zhì)資源豐富。獼猴桃各種營養(yǎng)物質(zhì)含量極為豐富,被稱為‘水果之王’,并已逐步成為果樹產(chǎn)業(yè)發(fā)展的亮點。但隨著獼猴桃栽培規(guī)模的擴(kuò)大,病害種類和危害程度也在不斷增加,給獼猴桃生產(chǎn)帶來嚴(yán)重威脅。其中,潰瘍病是栽培獼猴桃的一種毀滅性的細(xì)菌性病害,也無根除的有效辦法。
　　 目前對于獼猴桃的研究主要集中在栽培生理、組織培養(yǎng)及藥用

2、研究等方面,在多倍體及抗?jié)儾⌒缕贩N選育方面研究較少。本研究以獼猴桃優(yōu)質(zhì)紅肉品種紅陽為材料,建立了組織培養(yǎng)快繁體系,同時利用秋水仙素對其組培無菌苗進(jìn)行了多倍體誘導(dǎo)研究,獲得了四倍體,并對四倍體與二倍體的特征特性及對潰瘍病的抗性進(jìn)行了比較,為最終獲得獼猴桃抗?jié)儾⌒缕贩N的選育奠定了基礎(chǔ)。
　　 1.以二倍體紅陽獼猴桃莖段為外植體,建立了快繁體系。最佳外植體滅菌方法為:70％乙醇10s,0.1％升汞滅菌4min,無菌水沖洗5次。誘導(dǎo)

3、不定芽分化的最適培養(yǎng)基為WPM+0.6mg/L TDZ+0.1mg/L NAA,誘導(dǎo)率為80％,成芽數(shù)為2.0;不定芽最適增殖培養(yǎng)基為MS+2.0mg/L6-BA+0.04mg/L NAA,增殖系數(shù)為5.5,植株粗壯,葉色濃綠,愈傷少。最適生根培養(yǎng)基為1/2MS+0.6mg/L NAA,生根率為90％,平均根數(shù)為7.9條,植株及根系生長良好。
　　 2.利用秋水仙素溶液,采用浸泡法及混培法對二倍體組培苗進(jìn)行了多倍體誘導(dǎo)研究。結(jié)果

4、表明:0.2％秋水仙素浸泡離體組培苗莖尖48h誘導(dǎo)率較高,誘導(dǎo)率為20％,四倍體誘導(dǎo)率為15％;秋水仙素混培法以20mg/L秋水仙素加入培養(yǎng)基中處理10d誘導(dǎo)效果最好,誘導(dǎo)率為10％,其中四倍體誘導(dǎo)率為5％,浸泡法誘導(dǎo)四倍體的頻率比混培法高。經(jīng)染色體數(shù)目鑒定,獼猴桃四倍體染色體條數(shù)為2n=4x=116。二倍體最適培養(yǎng)基也較適宜四倍體獼猴桃的增殖等培養(yǎng),其增殖系數(shù)達(dá)到4.5,生根率為70％,平均根數(shù)為4條,但生根速度較二倍體慢。
　

5、　 3.對誘導(dǎo)所得到的四倍組培苗與二倍體進(jìn)行了特征特性比較。結(jié)果表明:四倍體莖增粗,葉片變大增厚,葉色濃綠。四倍體葉長、葉寬、葉厚分別為二倍體的1.18、1.48、1.06倍,葉形指數(shù)為二倍體的76.6％;葉綠素含量增加,四倍體葉綠素含量為二倍體的1.82倍。四倍體氣孔增大、氣孔密度減小、氣孔保衛(wèi)細(xì)胞也比二倍體大,四倍體氣孔密度為二倍體的52.5％,保衛(wèi)細(xì)胞長度及寬度分別為二倍體的1.45倍及1.33倍。
　　 4.對四倍體與

6、二倍體的抗旱性及抗熱性進(jìn)行了比較。結(jié)果表明:四倍體的葉片持水力高于二倍體,為二倍體的1.57倍,而細(xì)胞膜損傷率及滲透率均低于二倍體,分別為二倍體的36.4％及65.9％,表明四倍體的抗旱性及抗熱性均強(qiáng)于二倍體。
　　 5.同工酶活性檢測及電泳分析表明,四倍體與二倍體相比,其POD酶活性及SOD酶活性均高于二倍體,其中四倍體POD活性為二倍體的4.5倍,而SOD酶活性為二倍體的2.2倍,但是四倍體沒有特異性的酶帶,與二倍體的酶帶相