懷地黃四倍體誘導(dǎo)及生物學(xué)特性研究.pdf

1、INVITROPRODUCTl0NANDBIOLOGYCHARACTERISTICSRESEARCHOFAUTOTERAPLOIDSOFREHMANNlAGLUTlNOSAFHUEICHlNGENSIS(CHANETSEHIH)HSlAOADissertationSubmittedtotileGraduateSchoolofHenanNormalUniversityinPartialFulfillmentoftheRequirement

2、sfortheDegreeofMasterofScienceByWangfianjunSupervisor：ProfLiMingffunMay2012摘要懷地黃[Rehmanniaglutinosafhueichingensis(ChanetSehih)llsiao]gE我國(guó)著名的“四大懷藥”之一，產(chǎn)F河南溫縣、武陟等地，因長(zhǎng)期進(jìn)行營(yíng)養(yǎng)繁殖導(dǎo)致其產(chǎn)量F降、品質(zhì)退化t吲此培育高產(chǎn)、擾質(zhì)、抗逆的新配種對(duì)懷地黃的生產(chǎn)具有重要的意義。本文對(duì)懷地

3、黃四倍體植株的誘導(dǎo)及鑒定、二倍體和四倍體植株的同工酶差異、抗低溫能力、大罔形態(tài)、生理、產(chǎn)量和品質(zhì)的比較進(jìn)行了系統(tǒng)的研究，結(jié)果如下：l四倍體植株的誘導(dǎo)。利用組織培養(yǎng)結(jié)合秋水仙索誘變技術(shù)將懷地黃植株的帶芽莖段采用秋水仙素溶液浸泡和培養(yǎng)基中添加秋水仙素兩種方法均能夠誘導(dǎo)出四倍體，屜佳組合方式分別是01％的秋水仙索溶液浸泡懷地黃帶芽莖段24h，誘導(dǎo)率為129％：在培養(yǎng)基中添加005％秋水仙素培養(yǎng)一阡地黃帶芽莖段7d，誘導(dǎo)率為125％。2刪倍件植

4、株的鑒定。二：倍體和凹倍伴的倍性鑒定采用南接鑒定法(染色體計(jì)數(shù)法)和『日J(rèn)接舉定法(單位視野內(nèi)氣孔數(shù)日、保衛(wèi)細(xì)胞大小)，均能攀定出_倍體和四倍體。結(jié)果表明，二倍體細(xì)胞染色體數(shù)為56條四倍體細(xì)胞染色體數(shù)位112條；二倍體和四倍體下表皮單位視野內(nèi)氣孔下均密度分別為6600個(gè)和4920個(gè)、保n細(xì)胞長(zhǎng)分別為24oo／ma和4356Itm、f毓衛(wèi)細(xì)胞寬分刖為8】OBm和131I“m。3二倍體和叫倍體生物學(xué)特性比較：(1)同工酶比較。比較i倍體和四

5、倍體試管苗POD和SOD同工酶發(fā)現(xiàn)，四倍體試管苗POD同_|_=酶譜帶比一倍體多條b港帶，a譜帶顏色加深；四倍體試管苗SOD同工酶比一倍體多條e譜帶，di普帶比倍體亮，c潛帶較二倍體暗。(2)抗低溫脅迫比較。1_E10℃／5℃(晝／夜)低溫脅迫F四倍體試管苗的相對(duì)電導(dǎo)率和MDA含量小于二倍體：l葉綠索古量、可溶性蛋白質(zhì)臺(tái)量、POD、SOD高于二倍體。表明懷地黃四倍體試管苗能夠減少低溫對(duì)細(xì)胞的傷害，低溫抗性要高]：二倍體。(3)農(nóng)藝性狀和