山楂中紅果酸GC-MS分析方法的建立及黃烷醇抗氧化作用研究.pdf

1、山楂是一種重要的藥食兩用植物資源,國(guó)內(nèi)外許多學(xué)者對(duì)其進(jìn)行的研究表明,其含有多種生理活性成分,因而具有多種藥理作用。本研究室前期在對(duì)中國(guó)山楂研究中指出了山楂果實(shí)中的主要活性成分為低聚原花青素(OPC),主要是表兒茶素及其形成的聚合物。我們也首次發(fā)現(xiàn)紅果酸(eucomic acid)在山楂中才存在,并從山楂果里分離制備出了這一具有山楂果實(shí)特征香氣的成分。本論文在之前研究基礎(chǔ)之上,開(kāi)展了以下研究工作:
　　 (1)建立了氣相色譜.質(zhì)譜

2、聯(lián)用測(cè)定山楂及其制品中紅果酸的分析方法。山楂果實(shí)及其制品經(jīng)過(guò)無(wú)水乙醇提取,用硫酸甲醇(12％,v／v)溶液在80℃水浴中酯化1 h后,經(jīng)過(guò)HP-5ms毛細(xì)管色譜柱分離,串聯(lián)質(zhì)譜對(duì)紅果酸進(jìn)行定性和定量分析。色譜質(zhì)譜條件為:初始60℃保持1 min,以20℃／min升至160℃,保持1 min,再以20℃／min升至250℃,保持3 min。氦氣流速1 ml／min,分流比20:1,進(jìn)樣1μL,進(jìn)樣口溫度250℃,接口溫度250℃。離子化方

3、式為電子轟擊(EI),電子能量70 eV,離子源溫度230℃,四級(jí)桿溫度150℃。該條件下紅果酸的保留時(shí)間為12 min,該方法的回收率在87％～102％,相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差在3.1％～5.6％,以10倍信噪比為限,定量限為0.7μg(樣品中紅果酸的含量)。該方法快速、準(zhǔn)確、靈敏度高。
　　 采用開(kāi)發(fā)的GC-MS方法對(duì)山楂實(shí)際樣品中紅果酸的含量進(jìn)行了測(cè)定,山楂果實(shí)含量為255 mg／kg,山楂果醬7.2 mg／kg,兩種山楂果汁分別為

4、17.9、15.4 mg／kg,山楂羹5.1 mg／kg,山楂糕7.8 mg／kg,數(shù)據(jù)顯示山楂制品中紅果酸含量較鮮果中的明顯偏低,因此我們認(rèn)為可將紅果酸含量作為山楂及其制品重要質(zhì)量指標(biāo)之一,這不僅能為評(píng)價(jià)山楂果的內(nèi)在質(zhì)量提供科學(xué)依據(jù),更重要的是能指導(dǎo)山楂加工過(guò)程中制定合理的工藝參數(shù),最大程度的保持山楂制品的有效成分。
　　 (2)對(duì)五種山楂黃烷醇類化合物之間清除DPPH-自由基活性大小進(jìn)行了研究。結(jié)果表明,山楂黃烷醇類化合物具

5、有很強(qiáng)的清除DPPH-自由基能力,其EC50值在1.4～1.7mg／L之間,均低于幾種參照抗氧化劑(Vc、Trolox、TBHQ及脂溶性茶多酚)。隨著黃烷醇類化合物聚合度的增高,其清除能力越強(qiáng),且鏈接方式不同,清除自由基能力也不同,其中以C-4、C-6位鏈接的原花青素B5其清除能力大于以C-4、C-8位鏈接的原花青素B2。為了更好的了解黃烷醇化合物之間的清除自由基能力,測(cè)定了黃烷醇類化合物與DPPH-自由基反應(yīng)的二階速率常數(shù)k2,其大小

6、為原花青素D1>原花青素C1>原花青素B5>原花青素B2>表兒茶素。
　　 山楂黃烷醇提取物抗油脂氧化試驗(yàn)的結(jié)果表明,山楂黃烷醇提取物能有效抑制油脂過(guò)氧化作用,是一種有效的自由基清除劑和抗氧化劑,對(duì)油脂的抗氧化能力有劑量效應(yīng)關(guān)系,即隨著劑量的增大,油脂過(guò)氧化能力下降。添加0.1％山楂黃烷醇效果與0.02％TBHQ相當(dāng)。Vc、檸檬酸、脂溶性茶多酚對(duì)山楂黃烷醇提取物在油脂中均有協(xié)同抗氧化作用,復(fù)合使用抗氧化劑要比單一使用效果明顯。以