低能N+注入選育高毒力白僵菌及對(duì)油茶害蟲(chóng)的毒力測(cè)試.pdf

1、白僵菌Beauveria bassiana(Bals.)Vuillemin是半知菌類的一種廣譜性昆蟲(chóng)病原真菌。它的寄主范圍廣泛，具有感染能力強(qiáng)、擴(kuò)散流行性好、不污染環(huán)境等特點(diǎn)，同時(shí)原材料價(jià)廉易得，易于培養(yǎng)生產(chǎn)簡(jiǎn)單。隨著化學(xué)農(nóng)藥的過(guò)度使用，“3R”問(wèn)題日益嚴(yán)重，白僵菌作為防治農(nóng)林害蟲(chóng)的主要生防菌劑之一，在生產(chǎn)應(yīng)用中越來(lái)越受到重視。低能離子注入誘變是80年代我國(guó)學(xué)者首創(chuàng)的一類高新育種技術(shù)。離子束與生物體作用有能量沉積、動(dòng)量傳遞、質(zhì)量沉積及電

2、荷的中和與交換效應(yīng)，離子束具有較強(qiáng)的電離作用，同時(shí)產(chǎn)生高活性自由基團(tuán)的間接損傷作用，誘發(fā)影響細(xì)胞生理、生化性能的遺傳物質(zhì)--堿基的改變，染色體結(jié)構(gòu)變異，是一類高效、方便、安全無(wú)污染的新型誘變?cè)?，且突變譜廣、損傷輕、正突變率高、性狀穩(wěn)定。但應(yīng)用于白僵菌方面的研究還鮮有報(bào)道。
　　 油茶是中國(guó)南方重要木本油料樹(shù)種，油茶種子經(jīng)壓榨而成的茶油富含豐富的不飽和脂肪酸足一種高檔食用油。油茶害蟲(chóng)一共100多種危害其根、莖、葉還有果實(shí)，其中油茶

3、毒蛾、油茶葉蜂和油茶象甲足其中一些主要的害蟲(chóng)幾十年來(lái)對(duì)油茶產(chǎn)量造成了嚴(yán)重的損害影響了油茶效益的發(fā)揮。白僵菌作為一種有效的生物防治手段已經(jīng)被應(yīng)用于農(nóng)林生產(chǎn)在有害生物的綜合治理體系中發(fā)揮重要作用。本項(xiàng)研究旨在誘變選育出高毒力球孢白僵菌并為其在油茶無(wú)公害產(chǎn)業(yè)上的應(yīng)用提供理論基礎(chǔ)。
　　 本研究以低能氮離子注入作為誘變手段對(duì)球孢白僵菌進(jìn)行誘變，并對(duì)幾種油茶主要害蟲(chóng)進(jìn)行了毒力測(cè)試。結(jié)果表明：不同劑量的氮離子注入后白僵菌存活率呈“馬鞍曲線”

4、，其峰值即150×1013 ions·cm-2作為誘變最佳劑量。氮離子注入對(duì)白僵菌的菌落形態(tài)、產(chǎn)孢量、孢子萌發(fā)率等生長(zhǎng)特性均有影響，通過(guò)產(chǎn)孢量、Pr1蛋白酶活和幾丁質(zhì)酶活指標(biāo)篩選我們得到3株優(yōu)良菌株，其中BbⅢ22菌株的Pr1蛋白酶活和幾丁質(zhì)酶活分別達(dá)0.230、0.137(OD值)為出發(fā)菌株的近2倍水平。
　　 測(cè)試了球孢白僵菌BbⅢ05、BbⅢ22、BbⅢ28菌株對(duì)油茶葉蜂、油茶毒蛾、油茶象甲3種試蟲(chóng)的毒力效果。結(jié)果表明：孢

5、子濃度為107 spores·mL-1時(shí)3種球孢白僵菌對(duì)油茶葉蜂、油茶毒蛾有較強(qiáng)的致病力，致死率達(dá)到了80％以上，而對(duì)油茶象甲的致病力較差只有50％左右。其中BbⅢ22菌株的效果尤為顯著，對(duì)油茶葉蜂、油茶毒蛾、油茶象甲的LD50對(duì)數(shù)濃度及95％置信區(qū)間分別為5.2960(4.7925～5.6194)、5.6347(5.2125～6.0091)、6.3555(5.6925～7.1509)。
　　 對(duì)球孢白僵菌BbⅢ22固態(tài)發(fā)酵條件