四川部分地區(qū)雞沙門氏菌的分離鑒定及其弱毒株的培育.pdf

1、雞沙門氏菌病是由沙門氏菌屬中的一種或幾種沙門氏菌引起的一類急性或慢性疾病的總稱，包括雞白痢、雞傷寒和雞副傷寒。臨床上以敗血癥和腸炎最為常見。本病在世界各地普遍存在，它不僅嚴(yán)重危害養(yǎng)雞業(yè)的發(fā)展，而且還可以通過禽產(chǎn)品進(jìn)入食物鏈，并嚴(yán)重威脅到人類的健康，是一種人畜共患的傳染病。長期以來，在我國的大部分雞場中都是通過采用抗菌藥物來防治此病的。由于抗菌藥物的不合理使用，已造成了沙門氏菌耐藥性的不斷增強(qiáng)，甚至還表現(xiàn)出多重耐藥性，如此使得防治該病變得

2、極其困難。近些年，國外許多國家已經(jīng)使用疫苗對禽類進(jìn)行免疫并取得了較好的效果。本試驗對四川省7個地區(qū)26個雞場中的108份病料進(jìn)行了沙門氏菌分離與鑒定，并對其流行株進(jìn)行了弱毒株培育、弱毒疫苗制備等研究，旨在為該地區(qū)雞沙門氏菌病的流行病學(xué)調(diào)查、疫苗預(yù)防和治療提供參考資料。
　　采用沙門氏菌選擇性培養(yǎng)基，分別對來自26個養(yǎng)雞場的108份病料進(jìn)行細(xì)菌分離，并對分離菌進(jìn)行形態(tài)學(xué)觀察、PCR檢測、生化鑒定、血清型鑒定、藥敏試驗和致病性試驗。結(jié)

3、果顯示，從108份病料中鑒定出了28株沙門氏菌，分離率為25.9％，其中有9株符合雞白痢沙門氏菌的生化特性，19株菌符合雞傷寒沙門氏菌的生化特性;多數(shù)分離菌血清型為O2，O9，O9,12型;28株雞沙門氏菌均為致病菌，且僅對阿米卡星、新霉素、頭孢哌酮等藥物敏感，對大多數(shù)抗菌藥物均產(chǎn)生耐藥性。
　　選取來自9個雞場的10株雞傷寒沙門氏菌，通過對其毒力和免疫原性進(jìn)行檢測，篩選出1株免疫原性好且毒力偏弱的菌株TQ-1-1。以TQ-1-1

4、為出發(fā)菌株，將其進(jìn)行紫外線-亞硝酸復(fù)合誘變處理，從所得突變菌株中篩選弱毒株，并對弱毒株進(jìn)行傳代培養(yǎng)及生物學(xué)特性檢測。結(jié)果顯示，選育出了1株遺傳性穩(wěn)定、免疫原性良好的雞傷寒沙門氏菌弱毒株CN505-120，其對小鼠的LD50為1.85×109CFU，與出發(fā)菌株TQ-1-1相比，毒力減弱了將近14倍。
　　對CN505-120弱毒菌株進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)，然后通過菌液濃度、耐熱凍干保護(hù)劑與菌體感作時間、疫苗分裝體積等的篩選，優(yōu)化出最佳的疫苗配