玉米ZmCBL10的克隆及ZmCBL6和ZmCBL8的功能鑒定.pdf

1、類鈣調(diào)磷酸酶 B蛋白（Calcineurin B-like proteins，CBLs）做為植物特有的Ca2+感受器，在植物響應(yīng)各種非生物脅迫中發(fā)揮重要的調(diào)節(jié)作用。在玉米基因組中至少有9個 CBL基因，本論文首次對其中 ZmCBL10進(jìn)行了克隆，并對 ZmCBL6和ZmCBL8的抗逆功能進(jìn)行了鑒定。主要研究結(jié)果如下：
　?。?）采用RT-PCR方法克隆到 ZmCBL10基因 cDNA編碼區(qū)，推測它由942bp組成，編碼含有313個

2、氨基酸殘基的蛋白，其分子量為35.16KDa，等電點為5.14。
　?。?）將ZmCBL10 cDNA編碼區(qū)構(gòu)建到植物表達(dá)載體 p3300上，經(jīng)菌液 PCR和質(zhì)粒酶切鑒定證明表達(dá)載體構(gòu)建成功；然后將其轉(zhuǎn)入根癌農(nóng)桿菌 GV3101，為進(jìn)一步轉(zhuǎn)化植物做好了準(zhǔn)備。
　　（3）采用沾花法將實驗室在前期構(gòu)建好的ZmCBL6和ZmCBL8表達(dá)載體轉(zhuǎn)化擬南芥，經(jīng)篩選和分子檢測獲得轉(zhuǎn)基因株系。
　?。?）通過對 ZmCBL6和ZmCB