河南省蘋果輪紋病菌桿干致病力分化與遺傳多樣性.pdf

1、蘋果輪紋病[Botryosphaeria dothidea(Moug.)Ces.et De Not]是我國(guó)蘋果三大病害之一,在全國(guó)主要蘋果產(chǎn)區(qū)均有發(fā)生。近年蘋果套袋栽培大面積推廣,對(duì)果實(shí)危害有所控制,但是蘋果枝干輪紋病發(fā)生逐年加重。本研究對(duì)重病區(qū)河南省主要產(chǎn)區(qū)的蘋果枝干輪紋病的發(fā)生進(jìn)行調(diào)查并對(duì)各地區(qū)蘋果輪紋病菌進(jìn)行初步鑒定。用收集的菌株對(duì)感病品種富士和抗病品種秦冠分別進(jìn)行接種試驗(yàn)鑒定各個(gè)菌株的致病力,分析河南省蘋果輪紋病菌的致病力分化。

2、同時(shí)通過對(duì)部分蘋果輪紋病菌ITS序列測(cè)序和ISSR標(biāo)記分析蘋果輪紋病菌的遺傳多樣性。主要研究結(jié)果如下:
　　 1.2007年7月至8月對(duì)河南省主要蘋果產(chǎn)區(qū)的16個(gè)縣市、30個(gè)果園蘋果枝干輪紋病進(jìn)行調(diào)查,除靈寶一個(gè)山腰上的果園發(fā)病率為8％,其余果園發(fā)病率均為100％。從采集的病樣中分離獲得172份純培養(yǎng)菌株,在PDA培養(yǎng)基上觀察所有菌株菌落形態(tài)和測(cè)量在離體蘋果枝條上誘導(dǎo)產(chǎn)生的分生孢子大小,所有菌株初步鑒定為Botryosphaer

3、ia dothidea。
　　 2.菌株分別接種富士和秦冠后均表現(xiàn)一定的致病力分化,中等致病力菌株在病原菌群體中占優(yōu)勢(shì)。來自不同寄主的菌株無論對(duì)富士還是秦冠都表現(xiàn)致病力分化。對(duì)富士和秦冠的致病力聚類分析表明:河南省蘋果輪紋病菌群體中等致病力菌株和弱致病力菌株數(shù)量相當(dāng),強(qiáng)致病力菌株只占少數(shù)。來自同一地區(qū)菌株致病力分化現(xiàn)象也較普遍。洛陽(yáng)地區(qū)強(qiáng)致病菌株類群占優(yōu)勢(shì),其他地區(qū)都是以中等致病力菌株類群和弱致病力菌株類群為優(yōu)勢(shì)類群。本研究未發(fā)

4、現(xiàn)菌株的致病力的分化與地理來源有顯著相關(guān)性。
　　 3.對(duì)17個(gè)菌株進(jìn)行ITS序列測(cè)定在分子水平確認(rèn)是Botryosphaeria dothidea,且基于ITS序列分化成2個(gè)類型H1和H2。從40條ISSR引物中篩選出13條帶型清晰、可重復(fù)性的引物對(duì)以上菌株進(jìn)行ISSR分析,總計(jì)獲得121條擴(kuò)增條帶,平均每條引物擴(kuò)增條帶9.3條,其中有88條多態(tài)性條帶,平均每條引物擴(kuò)增出多態(tài)性條帶6.7條,平均多態(tài)性位點(diǎn)百分率72.07％。聚

5、類分析表明,供試64個(gè)菌株的遺傳相似系數(shù)為0.44-0.99,在0.73處被劃分為2個(gè)ISSR類群。其中ISSR類群1包含21個(gè)菌株,占64個(gè)菌株的33％,ISSR類群2包括43個(gè)菌株,占67％,ISSR類群2是B.dothidea群體中的優(yōu)勢(shì)類群。且B.dothidea的種內(nèi)分化與菌株的地域來源、寄主、癥狀以及分離部位無相關(guān)性。ISSR類群1以弱致病力菌株為絕對(duì)優(yōu)勢(shì)類群,ISSR類群2以中等致病力菌株為優(yōu)勢(shì)類群,絕大部分強(qiáng)致病力菌株和