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文檔簡介
1、土壤中蘊含著豐富的微生物資源,芽孢桿菌是其中具有重要應(yīng)用價值的微生物類群。有些菌種可以分泌多種酶,可應(yīng)用于工業(yè)生產(chǎn);有些菌種能產(chǎn)生對昆蟲毒性較強的蛋白,可生產(chǎn)微生物農(nóng)藥;有些菌種可作為多種分泌蛋白基因表達受體,在基因工程領(lǐng)域中有較高的應(yīng)用價值。為了探索河南省不同區(qū)域芽孢桿菌的多樣性,并期望從分離菌株中發(fā)現(xiàn)具有應(yīng)用價值的菌株,本研究從河南省不同區(qū)域采集土壤樣品,采用純培養(yǎng)的方法,分離獲得芽孢桿菌。利用特異性引物擴增法,進行基于16S rR
2、NA序列的系統(tǒng)發(fā)育分析,同時對部分代表菌株進行形態(tài)學觀測及生理生化分析,以期挑選出具有較大研究價值的菌株。結(jié)果如下:
通過分離與篩選,從河南省土壤中共得到341株產(chǎn)芽孢細菌。經(jīng)16S rRNA序列分析,總共被分為了24個OTUs(operational taxonomic unit),分屬于5個屬。其中Bacillus有20個種,Lysinibacillus有1個種, Ornithinibacillus有1個種,Brevi
3、bacillus有1個種, Paenibacillus有1個種。經(jīng)分析,河南省土壤中產(chǎn)芽孢細菌的優(yōu)勢種是Bacillus megaterium和Bacillus simplex,常見種為Bacillus subtilis、Bacilluscereus、Bacillus licheniformis和Bacillus amyloliquefaciens。根據(jù)各地土質(zhì)和植被的不同,將河南省劃分為中東部、西部、南部、北部四個不同區(qū)域,其中中東部
4、優(yōu)勢種是Bacillus subtilis、Bacillus megaterium和Bacillus cereus,西部優(yōu)勢種是Bacillusmegaterium和Bacillus cereus,南部優(yōu)勢種是Bacillus megaterium、 Bacillus simplex和Bacillus endophyticus,北部優(yōu)勢種是Bacillus subtilis、 Bacillus megaterium、 Bacillusc
5、ereus和Bacillus simplex。多樣性指數(shù)分析表明,中東部物種比其它區(qū)域更豐富,北部物種較少。結(jié)果顯示同種芽孢桿菌在不同的環(huán)境條件下分布不同,如Bacillusmegaterium在西部比例高達50%,而北部只有21%。同時在四個區(qū)域中都存在特有的菌種,表明了芽孢桿菌分布的多樣性。Unifrac計算得到的數(shù)據(jù)表明,不同區(qū)域間的物種存在著差異性。
通過對24個OTU中的代表菌株的形態(tài)學觀察和生理生化分析,篩選出
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