2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
已閱讀1頁,還剩57頁未讀, 繼續(xù)免費閱讀

下載本文檔

版權(quán)說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請進行舉報或認領(lǐng)

文檔簡介

1、豬鏈球菌(Streptococcussuis,SS)是一種嚴重影響?zhàn)B豬業(yè)發(fā)展的病原,共分為33種血清型,其中與疾病最為相關(guān)的是豬鏈球菌2型(SS2),也是臨床分離率最高的血清型。同時,豬鏈球菌還是一種重要的人畜共患病病原。病原的分離鑒定是診斷疾病和開展病原學(xué)研究的前提,經(jīng)典的方法是在分離培養(yǎng)的基礎(chǔ)上,開展病原的鑒定,由于豬鏈球菌比較容易失活,導(dǎo)致病料中活細菌的數(shù)量較少,分離率較低,影響和限制了有關(guān)病原菌的深層次探索和研究。建立快速、敏感

2、和特異的檢測方法,對該病的診斷及研究具重要意義。為建立一種新型檢測方法,本實驗作了如下探索。
   用純化的重組MRP蛋白抗原免疫Balb/c小鼠,制備脾細胞,與SP2/0骨髓瘤細胞系融合,經(jīng)間接ELISA檢測方法篩選和有限稀釋法克隆化,獲得2株能穩(wěn)定分泌抗MRP蛋白的單克隆抗體雜交瘤細胞株,分別命名為7H1和3B11,抗體亞類均為IgG2bκ,誘生腹水的抗體效價均為106。間接ELISA檢測特異性表明,2株單克隆抗體與其他不同

3、血清型菌株無交叉反應(yīng);免疫印跡(westernblot)分析,只有7H1能與重組MRP蛋白和HA9801菌體均產(chǎn)生特異性蛋白條帶,而3B11只能與重組MRP蛋白產(chǎn)生特異性蛋白條帶。純化后的重組MRP蛋白純度較高,達到篩選要求。表達的MRP篩選的陽性單克隆抗體不僅可以與重組表達的MRP反應(yīng),而且可與菌體反應(yīng),便于今后檢測應(yīng)用。
   制備了純度和特異性較高的豬鏈球菌2型HA9801多克隆抗體。以豬鏈球菌2型MRP蛋白單克隆抗體為捕

4、獲抗體包被磁珠,以多克隆抗體為檢測抗體,檢測豬鏈球菌2型抗原。試驗確定單抗和多抗的最佳工作濃度分別為5μg/mL和6.25μg/mL,抗原捕獲及多抗作用時間均為30min,酶標(biāo)二抗最佳稀釋度為1∶15000,制備好的免疫磁珠保存期為5個月,最終確立了豬鏈球菌2型磁珠夾心ELISA方法。該方法特異性較高,檢測實驗室保存的存在抗原交叉性的菌株時不出現(xiàn)陽性反應(yīng)。敏感性尚可,最低可在抗原量103CFU/mL時顯示陽性反應(yīng)。對人工感染病料的檢測結(jié)

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預(yù)覽,若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
  • 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護處理,對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內(nèi)容負責(zé)。
  • 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準確性、安全性和完整性, 同時也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

最新文檔

評論

0/150

提交評論