Bcl11a和Bcl11b基因抑制病毒增殖功能研究.pdf

1、Bcl11a和Bcl11b是鋅指蛋白樣轉(zhuǎn)錄因子，分別對(duì)B淋巴和T淋巴細(xì)胞的發(fā)育、分化和增殖起到重要調(diào)節(jié)作用。已有的研究也表明Bcl11a和Bcl11b作為核轉(zhuǎn)錄因子調(diào)控了一系列下游基因的表達(dá)，對(duì)細(xì)胞的增殖、周期調(diào)控和免疫的調(diào)節(jié)發(fā)揮了重要作用。同時(shí)，這兩個(gè)基因還被證實(shí)不僅與癌癥有密切關(guān)系，也可以抑制HIV-1病毒在細(xì)胞內(nèi)的轉(zhuǎn)錄和復(fù)制，發(fā)揮一定的抗病性。
　　鑒于Bcl11a和Bcl11b基因在淋巴細(xì)胞中的特異表達(dá)和對(duì)淋巴細(xì)胞生長發(fā)育

2、具有重要作用，然而，在免疫反應(yīng)及抗豬圓環(huán)病毒PCV2的功能不清楚，本研究以小鼠和PK15細(xì)胞為試驗(yàn)對(duì)象，豬圓環(huán)病毒2型PCV2為病原，主要采用基因敲除、基因超表達(dá)、熒光定量、Western blot和免疫熒光等方法，對(duì)Bcl11a和Bcl11b抑制PCV2增殖的作用和機(jī)理進(jìn)行了初步研究。同時(shí)，還以昆明小鼠為攻毒對(duì)象，初步探討了PCV2對(duì)淋巴細(xì)胞發(fā)育的影響。
　　主要研究成果如下:
　　(1)半敲除Bcl11a后（Bcl11

3、a+/-，Bcl11a表達(dá)量降低一半）小鼠免疫能力顯著降低，血清中PCV2病毒含量顯著上升，PCV2對(duì)脾臟細(xì)胞的感染能力也增強(qiáng)，對(duì)脾臟等免疫器官的損傷更加嚴(yán)重。
　　(2)超表達(dá)Bcl11a和Bcl11b能顯著抑制PCV2在PK15細(xì)胞中的增殖，病毒mRNA、DNA和蛋白水平都顯著降低。
　　(3) Bcl11a、Bcl11b和PCV2病毒沒有明顯的共定位。
　　(4) Bcl11a可以通過抑制Caspase3的活性抑

4、制由PCV2引起的細(xì)胞凋亡，而Bcl11b通過抑制NF-κB的表達(dá)并促進(jìn)抗凋亡蛋白bcl2、抗病毒蛋白IRF3和MX1的表達(dá)，抑制病毒增殖，減少細(xì)胞凋亡，說明Bcl11a、Bcl11b抑制病毒增殖的機(jī)制可能是通過不同途徑實(shí)現(xiàn)的。
　　(5) PCV2能導(dǎo)致發(fā)育中的淋巴細(xì)胞大量損耗，尤其是對(duì)B淋巴細(xì)胞的影響非常明顯。PCV2也可以抑制體外培養(yǎng)淋巴細(xì)胞的增殖，并對(duì)淋巴細(xì)胞發(fā)育相關(guān)重要基因有顯著的抑制作用，說明PCV2可以抑制早期淋巴細(xì)