肉仔雞脾臟和法氏囊基因的表達特性研究.pdf

1、雞脾臟、法氏囊表達基因是潛在的與機體免疫相關(guān)的基因，本研究對本課題組篩選的17個脾臟、法氏囊表達基因（已知基因和未知EST）進行其表達特性研究，研究30％能量限制對肉仔雞脾臟與法氏囊候選基因表達的影響，本試驗主要從以下兩個部分進行試驗研究。
　　試驗一
　　為了研究候選基因在不同組織中的表達情況，以7日齡矮腳絲毛烏骨雞為研究對象，采用半定量RT-PCR，觀察候選基因在肌胃，腸，腺胃，大腦，肝，胸肌，小腦，腿肌，心，肺，脾臟和

2、法氏囊中的相對表達量。
　　試驗二
　　本試驗選擇體重相近的18日齡健康雌性AA肉仔雞40只，隨機分成兩組，自由采食組和能量限制組，每組20只。采用個體單籠飼養(yǎng)，飼養(yǎng)至48日齡，進行屠宰，采集脾臟與法氏囊組織，能量限制組和自由采食組各20個樣本，以單個個體為重復單位。根據(jù)候選基因以及相關(guān)序列設(shè)計引物，采用熒光定量RT-PCR對候選基因及相關(guān)序列進行定量分析。試驗結(jié)果如下:
　　(1)在脾臟組織中，17個條帶在能量限制組

3、呈上調(diào)趨勢的為7條，呈下調(diào)趨勢的為10條，其中DAD1和ZNF644呈現(xiàn)表達差異顯著(p＜0.05)，DAD1呈下調(diào)趨勢，ZNF644呈上調(diào)趨勢。
　　(2)在法氏囊組織中，17個條帶在能量限制組呈上調(diào)趨勢的為5條，呈下調(diào)趨勢的為12條，其中ACTG表達差異顯著(p＜0.05)，呈上調(diào)趨勢。
　　(3)通過對差異表達基因功能分析表明:DAD1和ZNF644與疾病相關(guān);ACTG為高度保守基因，存在于大多數(shù)細胞類型中。