能量限制對肉仔雞脾臟和法氏囊基因表達效應的研究.pdf

1、為了研究30％能量限制對肉仔雞脾臟與法氏囊差異表達基因的影響，試驗采集48日齡健康雌性AA肉仔雞脾臟與法氏囊組織，能量限制組和自由采食組各20個樣本，以單個個體為重復單位，采用GenefishingTMDEGPremix試劑盒進行脾臟與法氏囊差異表達基因的篩選，使用半定量RT-PCR進行差異表達基因的鑒定。試驗結果如下：
　　 (1)通過GenefishingTMRT-PCR差異表達試驗在脾臟組織中發(fā)現了33個差異表達條帶，其中

2、差異表達片段呈上凋趨勢的為16條，呈下調趨勢的為17條，同時出現兩條特異性表達條帶，分別為P4-2和P12-4，其中P4-2特異性表達條帶在自由采食組特異性表達，P12-4特異性表達條帶在能量限制組呈現特異性表達。33條差異表達條帶中，成功回收、克隆、測序了21個差異表達EST；在法氏囊組織中發(fā)現了40個差異表達條帶，差異表達片段中表達呈上調趨勢的為27條，表達呈下調趨勢的為13條，能量限制組出現1條特異性表達條帶命名為F8-2。成功回

3、收，克隆和測序的片段為17個。
　　 (2)通過半定量RT-PCR的驗證表明：脾臟組織共計13個差異表達EST，9個呈明顯差異，4個無差異顯示；法氏囊組織共計11個差異表達EST，7個呈明顯差異，4個無差異顯示。
　　 (3)通過生物信息學分析表明：脾臟差異表達EST中有4個能夠找到高度同源的已知基因，4個有同源推測基因，另外13個是未知功能基因。法氏囊脾臟差異表達EST中有4個能夠找到高度同源的已知基因，2個有同源推測