基于M-C作圖進行牙鲆雌核發(fā)育二倍體的遺傳鑒定與分析.pdf

1、牙鲆是重要海水經(jīng)濟魚類。隨著養(yǎng)殖技術的發(fā)展,牙鲆已經(jīng)成為我國主要的海水養(yǎng)殖對象。伴隨牙鲆近親繁殖問題進行牙鲆遺傳改良研究,培育出具有生長快、體型大和抗逆性強等優(yōu)良性狀的新品種,將對我國牙鲆養(yǎng)殖業(yè)的可持續(xù)發(fā)展具有重要意義。本文研究主要基于微衛(wèi)星標記與著絲粒之間的相對距離,篩選位于連鎖群不同位置的微衛(wèi)星標記進行牙鲆有絲分裂雌核發(fā)育二倍體的遺傳鑒定和不同二倍體的比較研究。
　　1.本研究從日本第二代連鎖圖譜選擇均勻分布于牙鲆24個連鎖群

2、的72個微衛(wèi)星標記,用兩個正常的全同胞家系來驗證得到,72個微衛(wèi)星位點均符合孟德爾遺傳分離測驗。紫外線照射牙鲆精子并通過冷休克誘導而獲得4個減數(shù)分裂雌核發(fā)育家系,估計標記-著絲粒(Microsatellite-Centromere,M-C)之間的相對距離,。在假設無交叉干涉的情況下,17個標記位于著絲粒區(qū)域,19個標記位于連鎖群中部,36個標記位于遠著絲粒區(qū)域。用36個標記來鑒定有絲分裂雌核發(fā)育二倍體192尾。
　　2.以牙鲆選育

3、基礎群體為親本,選擇性腺發(fā)育良好的個體制備普通二倍體(ND),減數(shù)分裂雌核發(fā)育二倍體(MGD-1)、連續(xù)兩代減數(shù)分裂雌核發(fā)育二倍體(MGD-2),并利用MGD-1發(fā)育達性成熟的雌魚與同時誘導的性反轉(zhuǎn)偽雄魚交配制備近交二倍體(MGD-3)。從牙鲆遺傳連鎖圖譜選擇均勻分布于24個連鎖群的72個微衛(wèi)星標記,在假設無交叉干涉的情況下,17個標記位于著絲粒區(qū)域,19個標記位于連鎖群中部,36個標記位于端粒區(qū)域。分別選擇上述區(qū)域的微衛(wèi)星標記鑒定牙鲆

4、4種二倍體的遺傳特征。分析結(jié)果顯示,4種二倍體的等位基因數(shù)(A)和多態(tài)信息含量(PIC)在不同區(qū)域變化范圍較小,ND的A和PIC均為最高,MGD-3則表現(xiàn)為最低。隨著標記與著絲粒之間距離的增加,4種二倍體的觀測雜合度逐漸升高,純合度逐漸降低。純合個體比例在著絲粒區(qū)域最高,為8.8％-29.1%;在端粒區(qū)域最低,為2.4%-23.2%。其中,MGD-1和MGD-2的變化幅度顯著高于其余二倍體。由此證明,選擇連鎖群上不同位置的微衛(wèi)星標記對鑒