大黃魚雌核發(fā)育的誘導(dǎo)及遺傳分析.pdf

1、本文研究大黃魚人工雌核發(fā)育誘導(dǎo)條件的優(yōu)化，對(duì)胚胎發(fā)育進(jìn)行連續(xù)觀察，并利用微衛(wèi)星標(biāo)記對(duì)雌核發(fā)育一代和雌核發(fā)育二代的基因純合度進(jìn)行分析，通過建立減數(shù)分裂型人工雌核發(fā)育家系，研究了22個(gè)微衛(wèi)星標(biāo)記與著絲粒之間的遺傳距離。主要結(jié)果如下： 1.大黃魚人工雌核發(fā)育二倍體誘導(dǎo)條件的優(yōu)化。用不同劑量紫外線輻射過的精子誘導(dǎo)雌核發(fā)育，原腸期存活率和孵化率都呈現(xiàn)出明顯的Hertwig效應(yīng)。綜合受精率、原腸期存活率、孵化率和初孵仔魚形態(tài)正常率的觀測(cè)結(jié)果

2、，253800μw.cm-2-406080μw.cm-2是用紫外線進(jìn)行大黃魚精子遺傳失活的適宜照射劑量。對(duì)輻射持續(xù)時(shí)間、冷休克處理起始時(shí)間和持續(xù)時(shí)間進(jìn)行3因素3水平正交試驗(yàn)的結(jié)果表明，大黃魚減數(shù)分裂型雌核發(fā)育二倍體誘導(dǎo)的最適宜條件為紫外線輻射劑量355320μw.cm-2，授精后3 min開始冷休克，休克持續(xù)時(shí)間為10 min，在此條件下誘導(dǎo)率(形態(tài)正常二倍仔魚的孵化率)可達(dá)到20％。 2.利用微衛(wèi)星標(biāo)記分析了大黃魚雌核發(fā)育一代

3、(meio-G1)和雌核發(fā)育二代(meio-G2)的雜合度以及減數(shù)分裂型雌核發(fā)育的近交效應(yīng)。對(duì)普通養(yǎng)殖群體(C)、雌核發(fā)育一代群體和雌核發(fā)育二代群體的6個(gè)微衛(wèi)星位點(diǎn)進(jìn)行了分析，共檢測(cè)到21個(gè)等位基因。三群體等位基因數(shù)從多到少依次為C(21)>G1(20)>G2(13)；雌核發(fā)育一代(G1)和二代(G2)的平均觀測(cè)雜合度(HO)分別為0.195和0.031，均明顯低于普通養(yǎng)殖群體(0.494)，且G2平均觀測(cè)雜合度比G1減少了84.1％，

4、G1的實(shí)際近交系數(shù)為0.605，G2的實(shí)際近交系數(shù)為0.937?？梢娙斯ふT導(dǎo)雌核發(fā)育可導(dǎo)致基因快速地純合，是快速建立大黃魚遺傳純系的有效途徑。 3.利用篩選出來的22對(duì)母本基因型為雜合型的微衛(wèi)星引物分別對(duì)兩個(gè)減數(shù)分裂型雌核發(fā)育(meio-gynogenetic)一代家系和正常二倍體對(duì)照家系進(jìn)行遺傳分析。結(jié)果表明，兩個(gè)雌核發(fā)育家系的雌核發(fā)育個(gè)體的比例分別為100％和96.9％；在所觀察的22個(gè)微衛(wèi)星標(biāo)記位點(diǎn)中，4個(gè)位點(diǎn)的遺傳偏離了