廣西地方品系雞ALV的分離鑒定和引發(fā)急性纖維肉瘤的ALV-J株感染性實(shí)驗(yàn).pdf

1、本研究一方面對廣西龍勝鳳雞、三黃雞等地方品系雞的祖代、父母代種群進(jìn)行流行病學(xué)調(diào)查，開展禽白血病凈化研究，將ELISA抗原檢測為陽性的個體雞的無菌血清感染成纖維細(xì)胞，提取前病毒DNA，進(jìn)行核酸擴(kuò)增和測序。另一方面，將臨床上可引起急性纖維肉瘤的ALV-J的組織濾液以腹腔為接種部位感染裸鼠，并將發(fā)生急性纖維肉瘤的SPF雞的新鮮肉瘤組織細(xì)胞懸液以腋下為接種部位接種裸鼠，研究缺陷型ALV-J對裸鼠的感染性。
　　 通過禽白血病病毒的分離與

2、鑒定，從地方品系龍勝鳳雞和土雞中各分離到1株B亞群ALV，從三黃雞中分離到8株J亞群ALV。序列分析結(jié)果顯示龍勝鳳雞分離株GX-J-15的gp85氨基酸序列與國際上僅發(fā)表的4株B亞群代表毒株的同源性在91.7％以上，其中與山東地方品系蘆花雞分離株SDAU09C2的同源性高達(dá)98.1％;土雞分離株GX-J-14的gp85氨基酸序列與5株B亞群代表株的同源性在89％～90％，遠(yuǎn)高于與其他亞群的同源性。而兩個分離株的gp85氨基酸序列與J亞群

3、代表毒株的同源性僅為50％左右;從三黃雞中分離到的8株J亞群ALV，其gp85氨基酸序列與J亞群ALV參考株的gp85氨基酸序列同源性均在92％以上，而與其他亞群ALV的gp85氨基酸序列同源性均不超過54％，其中GX-J-12株與HPRS-103原型株的同源性達(dá)96.1％。本實(shí)驗(yàn)從廣西特有的地方品系龍勝鳳雞和土雞中各分離到一株B亞群ALV，從三黃雞中分離到八株J亞群ALV，在之前，本課題組從三黃雞中分離到一株A亞群ALV和一株E亞群A

4、LV，并從麻雞中分離到兩株J亞群ALV，說明我國地方品種最豐富的廣西已有所有亞群ALV的流行。通過序列比較分析發(fā)現(xiàn)，廣西地方品系流行株gp85部分與國內(nèi)外參考株均有較高的同源性，而3'LTR均已發(fā)生較大的變異，其中龍勝鳳雞分離株GX-J-15的gp85氨基酸序列與山東地方品系蘆花雞分離株SDAU09C2的同源性高達(dá)98.1％，可能來源于同一病毒的重組。
　　 將急性纖維肉瘤的ALV-J之組織研磨濾液接種SPF雛雞，雛雞在14日齡