喹賽多在豬、雞、魚、大鼠和人體內(nèi)的藥動(dòng)學(xué)研究.pdf

1、喹賽多作為喹噁啉類藥物的新品種，和同類藥物相比抗菌譜更廣，有顯著的促進(jìn)畜禽生長(zhǎng)和提高飼料利用率的作用。已有研究表明，喹賽多可以有效促進(jìn)畜禽及魚類的生長(zhǎng);同時(shí)，與同類藥物相比毒性更低，具有良好的開發(fā)應(yīng)用前景。作為一類新型獸用藥物的研發(fā)內(nèi)容，藥代動(dòng)力學(xué)是其中重要的部分。本研究采用平衡透析法測(cè)定喹賽多與雞、魚和大鼠血漿蛋白結(jié)合率，為揭示其體內(nèi)的作用特點(diǎn)及動(dòng)力學(xué)行為提供基礎(chǔ)資料;開展了三個(gè)劑量的喹賽多在豬、雞、魚和大鼠體內(nèi)的血液藥代動(dòng)力學(xué)研究，

2、計(jì)算了不同動(dòng)物體內(nèi)喹賽多及其代謝物藥動(dòng)學(xué)參數(shù)并擬合了藥物濃度-時(shí)間曲線，揭示了藥物在四種動(dòng)物體內(nèi)代謝及動(dòng)力學(xué)特征;此外，測(cè)定人口服喹賽多后喹賽多原形及其代謝物在血、尿和糞中含量，鑒定了在實(shí)驗(yàn)過程中不同時(shí)間點(diǎn)收集的血液、糞便和尿液樣品中的代謝物種類，闡明了喹賽多在人體的代謝及藥動(dòng)學(xué)特征以及與食品動(dòng)物的異同性，觀測(cè)了喹賽多對(duì)人體可能產(chǎn)生的不良反應(yīng)。研究中還采用人肝微粒體作為實(shí)驗(yàn)材料，對(duì)喹賽多進(jìn)行體外代謝研究，與喹賽多在實(shí)驗(yàn)動(dòng)物和靶動(dòng)物體內(nèi)、

3、體外代謝結(jié)果進(jìn)行比較，查看有無新的代謝物產(chǎn)生及代謝的種屬差異性。
　　1.喹賽多與雞、魚和大鼠血漿蛋白結(jié)合率的測(cè)定
　　血漿蛋白結(jié)合率直接影響藥物藥理及毒性作用，是藥物在體內(nèi)的重要參數(shù)之一。本研究采用平衡透析法結(jié)合HPLC，測(cè)定喹賽多與大鼠、魚和雞的血漿蛋白結(jié)合率。喹賽多平衡透析48h時(shí)可達(dá)到平衡狀態(tài)。在0.05、0.5和1.0mg/L濃度下，喹賽多與大鼠、魚和雞血漿蛋白結(jié)合率分別為67.23±1.47％、67.13±0.3

4、4％、60.97±0.63％;53.53±1.66％、41.66±1.36％、39.82±1.01％和37.30±0.98％、34.74±1.19％、32.54±1.74％。結(jié)果證明，喹賽多在大鼠血漿中屬于中血漿蛋白結(jié)合藥物，可能不利于藥物以游離形式進(jìn)入體內(nèi)發(fā)揮作用。喹賽多在魚和雞血漿中屬于低血漿蛋白結(jié)合藥物，有利于藥物以游離形式進(jìn)入體內(nèi)發(fā)揮作用。
　　2.喹賽多在豬、雞、魚和大鼠體內(nèi)的藥代動(dòng)力學(xué)研究
　　為探討不同劑量喹賽

5、多在四種動(dòng)物體內(nèi)的吸收、分布與消除特點(diǎn)，本試驗(yàn)在建立喹賽多及其5種代謝物在豬、雞、魚和大鼠血液中定量分析方法的基礎(chǔ)上，研究了豬、雞、魚和大鼠灌服不同劑量喹賽多后血液中原形及其5種主要代謝產(chǎn)物的經(jīng)時(shí)變化規(guī)律。24頭杜長(zhǎng)大三元雜交豬分別按照10、40和100mg/kgb.w.單次灌服喹賽多，給藥后分別在不同時(shí)間點(diǎn)經(jīng)前腔靜脈采集血液3-4mL;30只科寶肉雞單次灌服喹賽多50、100和200mg/kgb.w.，給藥后分別在不同時(shí)間經(jīng)翼靜脈叢采

6、集血樣2mL;210尾健康鯉魚單次灌服喹賽多10、20和40mg/kgb.w.，給藥后分別在不同時(shí)間經(jīng)鯉魚尾靜脈采集血樣3mL;90只Wistar大鼠分別單次灌服喹賽多100、300和500mg/kgb.w.，給藥后分別在不同時(shí)間經(jīng)大鼠眼眶靜脈叢采集血樣0.5mL;分離上述血漿并采用HPLC法檢測(cè)血藥濃度，用非房室法計(jì)算藥動(dòng)學(xué)參數(shù)。
　　豬:結(jié)果顯示，在豬血漿共檢測(cè)到5種化合物，分別是Cy0、Cy1、Cy2、Cy4和Cy6。原形C

7、y0最早在血漿中出現(xiàn)，低劑量下在0.75h能夠檢測(cè)到，中劑量和高劑量下于0.17h就可以檢測(cè)到。低劑量下，三種代謝物Cy1、Cy4和Cy6均在4h檢出。中劑量下Cy1、Cy4和Cy6也均在4h能檢出，Cy2在5h檢出。高劑量下Cy1最早在2h檢出，Cy2、Cy4和Cy6均在4h能檢出。40mg/kgb.w.劑量下，Cy0達(dá)峰濃度Cmax為0.04μg/mL，消除半衰期T1/2為7.41h，藥時(shí)曲線下面積(AUC)為0.19(h·μg·m

8、L-1)。Cy6達(dá)峰濃度Cmax為0.17μg/mL，消除半衰期T1/2為9.04h，藥時(shí)曲線下面積(AUC)為2.02(h·μg·mL-1)。結(jié)果表明，喹賽多和代謝物吸收迅速，吸收較少，分布廣，原形藥物比代謝物消除更快。不同劑量下，代謝物的濃度均高于原形藥物的濃度。Cy0、Cy1、Cy2和Cy4消除半衰期隨著劑量的升高沒有顯著性的變化，表明它們?cè)趧?dòng)物體內(nèi)可能遵循線性動(dòng)力學(xué)過程。Cy6的消除半衰期在不同劑量下隨著劑量的加大而延長(zhǎng)，提示其

9、在豬體內(nèi)可能存在非線性動(dòng)力學(xué)過程。研究結(jié)果揭示了喹賽多在豬體內(nèi)的動(dòng)力學(xué)特征及劑量依賴性，為深入研究喹賽多藥理、毒理學(xué)特點(diǎn)及臨床有效性與安全性提供科學(xué)依據(jù)。
　　雞:結(jié)果顯示，在雞血漿共檢測(cè)到2種化合物，分別是Cy0和Cy6;50和100mg/kgb.w.時(shí)，只能檢測(cè)到Cy6，最早檢出Cy6為給藥后0.5h;200mg/kgb.w.時(shí)，均檢測(cè)到Cy0和Cy6，最早檢出時(shí)間分別為給藥后0.17和0.5h。200mg/kgb.w.劑量下

10、，Cy0達(dá)峰濃度Cmax為0.034μg/mL，消除半衰期T1/2為2.91h，藥時(shí)曲線下面積(AUC)為0.07(h·μg·mL-1);Cy6達(dá)峰濃度Cmax為0.039μμg/mL，消除半衰期T1/2為3.66h，藥時(shí)曲線下面積(AUC)為0.09(h·μg·mL-1)。結(jié)果表明，喹賽多和代謝物吸收迅速，吸收較少，分布廣，原形藥物比代謝物消除更快。不同劑量下，代謝物的濃度均高于原形藥物的濃度。Cy6消除半衰期隨著劑量的升高沒有顯著性

11、變化，表明它們?cè)趧?dòng)物體內(nèi)可能存在線性動(dòng)力學(xué)過程。研究結(jié)果揭示了喹賽多在肉雞體內(nèi)的動(dòng)力學(xué)特征及劑量依賴性，為深入研究喹賽多藥理、毒理學(xué)特點(diǎn)及臨床有效性與安全性提供科學(xué)依據(jù)。
　　魚:結(jié)果顯示，在鯉魚血漿共檢測(cè)到3種化合物，分別是Cy0、Cy1和Cy6。低劑量下只檢測(cè)到Cy6一種代謝物，中劑量下檢測(cè)到兩種代謝物分別是Cy1和Cy6，高劑量下檢測(cè)到Cy0、Cy1和Cy6三種化合物。其中高劑量下原形Cy0最先被檢測(cè)出，給藥后0.25h就能

12、在血漿中檢測(cè)到;代謝物Cy1和Cy6在三個(gè)劑量下都是給藥后1h后能夠檢出。40mg/kgb.w.劑量下，Cy0達(dá)峰濃度Cmax為0.063μg/mL，消除半衰期T1/2為5.41h，藥時(shí)曲線下面積(AUC)為0.49(h·μg·mL-1)。Cy1達(dá)峰濃度Cmax為0.069μg/mL，消除半衰期T1/2為5.56h，藥時(shí)曲線下面積(AUC)為0.52(h·μg·mL-1)。Cy6達(dá)峰濃度Cmax為0.061μg/mL，消除半衰期T1/2

13、為8.68h，藥時(shí)曲線下面積(AUC)為0.64(h·μg·mL-1)。結(jié)果表明，喹賽多和代謝物吸收迅速，吸收較少，分布廣，原形藥物比代謝物消除稍快。不同劑量下，代謝物的濃度均高于原形藥物的濃度;隨著劑量升高各代謝物的峰濃度增大。代謝物Cy1和Cy6消除半衰期隨著劑量的升高無顯著變化，表明它們?cè)邗庴w內(nèi)是線性動(dòng)力學(xué)過程。研究結(jié)果揭示了喹賽多在鯉魚體內(nèi)的動(dòng)力學(xué)特征及劑量依賴性，為深入研究喹賽多藥理、毒理學(xué)特點(diǎn)及臨床有效性與安全性提供科學(xué)依據(jù)

14、。
　　大鼠:結(jié)果顯示，在大鼠血漿共檢測(cè)到原形和3種代謝物，分別是Cy0、Cy1、Cy4和Cy6，其中原形Cy0最早在血漿中出現(xiàn)，低劑量下在0.75h能夠檢出，中劑量和高劑量下于0.17h就可以檢出。低劑量下，三種代謝物均在2h檢出，中、高劑量下Cy1和Cy4在1h能檢測(cè)出，Cy6在2h檢測(cè)出。100mg/kgb.w.劑量下，Cy0達(dá)峰濃度Cmax為0.10μg/mL，消除半衰期T1/2為6.35h，藥時(shí)曲線下面積(AUC)為0.

15、51(h·μg·mL-1);Cy6達(dá)峰濃度Cmax為0.22μg/mL，消除半衰期T1/2為8.50h，藥時(shí)曲線下面積(AUC)為2.28(h·μg·mL-1)。結(jié)果表明，喹賽多和代謝物吸收迅速，吸收較少，分布廣，原形藥物比代謝物消除更快，代謝物的濃度均高于原形藥物的濃度。Cy0、Cy1和Cy4消除半衰期隨著劑量的升高而延長(zhǎng)，表明它們?cè)趧?dòng)物體內(nèi)可能存在非線性動(dòng)力學(xué)過程。Cy6的消除半衰期在不同劑量下無顯著變化，提示其在大鼠體內(nèi)為線性動(dòng)力

16、學(xué)過程。研究結(jié)果揭示了喹賽多在大鼠體內(nèi)的動(dòng)力學(xué)特征及劑量依賴性，為深入研究喹賽多藥理、毒理學(xué)特點(diǎn)及臨床有效性與安全性提供科學(xué)依據(jù)。
　　3.喹賽多在人體內(nèi)藥動(dòng)學(xué)和肝微粒體的代謝研究
　　采用人肝微粒體作為實(shí)驗(yàn)材料，研究了喹賽多在人肝微粒體內(nèi)的代謝情況。用CO差示光譜法檢測(cè)CYP450的活性及含量，進(jìn)而用硝苯地平作為喹賽多代謝相關(guān)酶的探針底物，驗(yàn)證喹賽多代謝酶的活性。結(jié)果表明，喹賽多在人肝微粒體中可發(fā)生廣泛代謝，檢測(cè)到了成原形

17、Cy0和4種(Cy1、Cy2、Cy13和Cy15)代謝物，其中Cy1和Cy2含量最多，為主要的代謝物。在此研究條件下沒有發(fā)現(xiàn)新的代謝產(chǎn)物;主要的代謝途徑是脫氧和側(cè)鏈酰胺鍵的水解斷裂，代謝途徑與代謝方式跟實(shí)驗(yàn)動(dòng)物和食品動(dòng)物相比均沒有顯著差異。
　　健康受試者16人，隨機(jī)分為給藥組和對(duì)照組，給藥組10人，單劑量口服喹賽多(15mg/kgb.w.)膠囊劑。對(duì)照組6人，單劑量口服淀粉(15mg/kgb.w.)膠囊劑。給藥后分別在不同時(shí)間點(diǎn)

18、經(jīng)靜脈采血2mL，采用HPLC方法檢測(cè)血漿中喹賽多及其代謝物濃度，用非房室模型統(tǒng)計(jì)矩理論計(jì)算喹賽多及其代謝產(chǎn)物的藥動(dòng)學(xué)參數(shù)。收集給藥后不同時(shí)間段內(nèi)的糞便和尿液，計(jì)算藥物的回收量。同時(shí)，試驗(yàn)前后分別測(cè)定受試者的心電圖、血壓、脈搏、體溫等生理指標(biāo)。結(jié)果顯示，人血漿中檢出三種化合物分別是Cy0、Cy1和Cy6。Cy0出現(xiàn)最早，給藥后30min檢出。Cy1和Cy6都是給藥后6h檢出。Cy1藥動(dòng)學(xué)參數(shù):T1/2為8.34h，Cmax為0.068μ

19、g/mL，AUC(0-36h)為0.72(h·μg·mL-1)。Cy6的藥動(dòng)學(xué)參數(shù):T1/2為11.8h，Cmax為0.156μg/mL，AUC(0-36h)為2.04(h·μg·mL-1)。喹賽多在人體內(nèi)吸收較少，在人體內(nèi)存在形式以代謝物為主，吸收和消除比較快。在人的尿液中檢測(cè)到了原形Cy0和11種代謝物(分別是Cy1、Cy2、Cy4、Cy5、Cy6、Cy7、Cy8、Cy10、Cy13、Cy14和Cy15)，糞便中檢測(cè)到了原形Cy0和

20、10種(分別是Cy1、Cy2、Cy4、Cy6、Cy7、Cy8、Cy10、Cy12、Cy13和Cy15)代謝物。糞便和尿液中回收的藥物以原形藥物為主;相比發(fā)現(xiàn)，在糞便中回收的藥量遠(yuǎn)大于尿液中回收的藥物量。糞便和尿液中原形和代謝物給藥后三天基本檢測(cè)不到，糞便和尿液中藥物的總回收率為(36.13±2.22)％。給藥前后人的血液生理生化指標(biāo)沒有顯著性的改變且都在正常的生理范圍之內(nèi)。結(jié)果表明，喹賽多在人體內(nèi)代謝較快，代謝物種類較多，其代謝途徑與實(shí)