華東地區(qū)雞白痢沙門氏菌的分離鑒定，分子流行病學及致病性研究.pdf

1、沙門氏菌是重要的人畜共患病原菌，目前報道的血清型已超過2500個，呈全球性分布。禽沙門氏菌病是由沙門氏菌屬一個或多個成員所引起的急性或慢性傳染病，臨床上多表現(xiàn)為敗血癥和腸炎等。雞白痢沙門氏菌是其中的一員，特異性感染雞，不同品種、日齡的雞只均可感染。在我國，雞白痢沙門氏菌病依然是嚴重危害養(yǎng)禽業(yè)的傳染病之一。本研究對華東地區(qū)的活禽市場、某些動物醫(yī)院涉及的禽源性沙門氏菌進行了分離鑒定，并對其中雞白痢沙門氏菌的血清型、耐藥性和毒力基因進行分析;

2、運用病理組織學和免疫組織化學方法對雞白痢沙門氏菌分離株進行致病性的研究。為研究雞白痢沙門氏菌的致病機制提供理論依據(jù)。
　　1.禽源沙門氏菌的分離鑒定及血清型分析
　　本文旨在研究我國華東地區(qū)沙門氏菌分布情況及其優(yōu)勢菌的血清型變異情況。對2010年10月至2012年8月來源于江蘇、安徽、上海等地區(qū)的禽源樣品，進行增菌、純化、PCR鑒定、血清型鑒定及生化實驗，并對7株血清型有變異的疑似雞白痢沙門氏菌進行進一步序列測定，對血清型進

3、行分析。結(jié)果表明，本次調(diào)查中共分離沙門氏菌87株，傷寒沙門氏菌(2/87)、德爾卑沙門氏菌(4/87)、圣保羅沙門氏菌(1/87)、雞白痢沙門氏菌(78/87)及阿巴特圖巴沙門氏菌(2/87)并且在雞白痢沙門氏菌血清型H相存在Hd、Hg陽性的現(xiàn)象。結(jié)果提示，我國華東地區(qū)禽類沙門氏菌感染以雞白痢沙門氏菌為主，并存在血清型變異情況，變異概率呈上升趨勢。
　　2.雞白痢沙門氏菌的耐藥性分析
　　運用K-B法對2010年10月至20

4、12年8月華東地區(qū)分離到的雞白痢沙門氏菌分離株進行藥敏試驗。結(jié)果表明，分離株對萘啶酸、羧芐青霉素、鏈霉素、磺胺異噁唑和氨芐西林等抗菌藥物具有較高的耐藥性，而對慶大霉素、頭孢曲松、氯霉素和卡那霉素具有較強敏感性。78個雞白痢沙門氏菌分離株中，62株為多重耐藥菌。
　　3.雞白痢沙門氏菌毒力基因的分子流行病學調(diào)查
　　為了解雞白痢沙門氏菌的相關(guān)毒力因子的流行病學變化，本研究參考相關(guān)文獻中擴增毒力基因的引物，對位于78個雞白痢沙門

5、氏菌分離株的毒力島SPI-1、SPI-2、SPI-3、SPI-4、SPI-5上的毒力基因hilA、sseL、mgtC、siiE、sopB進行PCR檢測，并篩選10株分別來源于雞、鴨、鵝、鴿源的的分離株進行測序分析。結(jié)果顯示78株雞白痢沙門氏菌均攜帶5個毒力基因，位于SPI-1、SPI-2及SPI-3的hilA、sseL、mgtC基因高度保守(100％)，而位于SPI-4、SPI-5的siiE和sopB基因在個別位點出現(xiàn)突變。
　　

6、4.雞白痢沙門氏菌的致病性研究
　　在所分離的雞白痢沙門氏菌中，根據(jù)時間、地點篩選12株具有代表性的分離株進行動物致死性感染實驗，并篩選2株致病性強的分離株進行半數(shù)致死實驗及動物定居實驗，經(jīng)口服接種，分別在第3天、7天、14天、21天、28天對SPF雞的肝、脾、盲腸、法氏囊進行細菌分離和病理組織和免疫組化學研究。結(jié)果顯示分離株接種后第3天實驗雞出現(xiàn)病變，第7-14天病變最為嚴重，第21天后病變明顯好轉(zhuǎn)。感染過程中各組織中沙門氏菌數(shù)