溫度處理對黑線倉鼠生理、行為的影響及其分子機制研究.pdf

1、黑線倉鼠(Cricetulus barabensis)是我國主要的農田害鼠之一,黑線倉鼠種群具有較高的繁殖力和明顯的繁殖節(jié)律,這是內因(基因調控)和外因(環(huán)境因子)共同作用的結果。因此,開展黑線倉鼠種群繁殖機制和繁殖節(jié)律的研究就顯得尤為重要。本研究從黑線倉鼠繁殖的關鍵基因入手,結合其生存環(huán)境中的關鍵環(huán)境因子,以分子生物學方法為主,輔以生態(tài)學、生理學和行為學等手段,揭示害鼠種群繁殖節(jié)律和波動機制,為鼠害的綜合防治提供新思路。
　　本

2、研究包括以下三個主要的實驗研究:
　　實驗研究一:采用RT-PCR的方法克隆黑線倉鼠促性腺激素釋放激素(gonadotropin-releasing hormone,GnRH)部分cDNA序列。GnRH是與繁殖相關的關鍵基因,在體內分布廣泛、功能多樣、調控系統(tǒng)復雜,但普遍認為其核心作用的通過下丘腦-垂體-性腺軸調控動物的生殖。本研究共得到黑線倉鼠GnRH cDNA序列355bp,包括291bp的編碼區(qū)全序列,GeneBank登錄號

3、為KC608826。采用分子生物學軟件對其核苷酸序列、蛋白序列進行分析,預測并分析其蛋白的二級結構和三級結構。本研究所得結果同時也為后續(xù)實驗奠定了基礎。
　　實驗研究二:對GnRH的差異表達和功能多樣性展開研究。首先采用熒光定量PCR的方法比較GnRH在雌雄黑線倉鼠亞成年期、成年期(♂)、成年發(fā)情間期(♀)、成年發(fā)情期(♀)以及老年期四個階段的中樞(下丘腦)和外周器官(性腺)中的相對表達量。結果發(fā)現(xiàn)GnRH的表達在不同組織間、不同

4、性別間、不同生長階段以及不同發(fā)情周期中均有明顯差異,體現(xiàn)了GnRH在黑線倉鼠生殖調控中的功能多樣性和調控的復雜性;然后通過對黑線倉鼠胃腸道GnRH表達的研究,證實了GnRH在黑線倉鼠胃腸道確有微量表達,且表達量存在差異,為GnRH功能多樣性研究提供了補充。本研究結果同時也為后續(xù)實驗提供了理論依據。
　　實驗研究三:在收集并統(tǒng)計山東省近20年氣象資料基礎上,從影響黑線倉鼠生殖生長的關鍵環(huán)境因子入手,給黑線倉鼠設置不同的環(huán)境溫度,然后