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文檔簡介
1、柑橘細菌性潰瘍病(Citrusbacterialcankerdisease,CBCD)是一種國內(nèi)外檢疫性病害,嚴重制約著柑橘產(chǎn)業(yè)的發(fā)展。因此,創(chuàng)制抗病品種是解決潰瘍病危害的一個重要途徑。本研究通過根癌農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化,將pthA基因和Xa27基因轉(zhuǎn)化潰瘍病敏感類型檸檬(Citrus.LemonL.)中,獲得轉(zhuǎn)基因植株,并對轉(zhuǎn)基因植株進行鑒定和接種分析。主要結(jié)果如下:
1、通過農(nóng)桿菌介導(dǎo)的上胚軸轉(zhuǎn)化方法,pthA基因轉(zhuǎn)化約500個外植
2、體,鑒定57株檸檬,其中陽性植株45株,陽性率為78.9%。Xa27基因轉(zhuǎn)化約1000個外植體,鑒定29株檸檬,其中陽性植株10株,陽性率為34.5%。
2、通過基因表達分析,篩選pthA轉(zhuǎn)化的拌7、#22、#23三個系進行潰瘍病接種試驗,發(fā)現(xiàn),接種4d后,野生型和轉(zhuǎn)基因植株均開始發(fā)病。但前者發(fā)病率達到100%,病點率86%。轉(zhuǎn)基因株系#7和#23發(fā)病率雖然達100%,但病點率分別為72%和47%,較野生型低。同時發(fā)現(xiàn),野生型
3、植株病斑顯著大于#7和#23。轉(zhuǎn)基因株系#22發(fā)病率為75%,病點率為33%,病斑大小為0.028cm2,三個參數(shù)均低于野生型檸檬。在病情指數(shù)上,轉(zhuǎn)基因檸檬三個系都明顯低于野生型。表明,轉(zhuǎn)基因植株抗?jié)儾∧芰υ鰪姟?br> 3、對轉(zhuǎn)Xa27檸檬#5和#25兩個系進行潰瘍病接種試驗。接種4d后發(fā)現(xiàn),轉(zhuǎn)基因株系#5和#25發(fā)病率分別為50%和33.3%,病點率分別為14%和40%,病斑大小分別為0.019cm2和0.012cm2,遠遠小于
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