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文檔簡介
1、該論文以Bt 毒蛋白Cry1Ab 轉基因水稻為材料,建立了從轉基因植株中分離純化外源基因表達產物 Cry1Ab 的二次高效液相離子色譜法;研究了處于有關緩沖溶液中的 Cry1Ab 蛋白構象性質及殺蟲活性;以此為基礎,用<'125>I標記二次色譜分離所得到的高純度Cry1Ab蛋白,制得放射性探針;用該探針進行Western雜交實驗證實了二化螟中腸存在Cry1Ab 受體蛋白;進一步用分子生物學有關方法克隆到二化螟中腸Cry1Ab 受體基因(
2、Bt-R<,3>)cDNA全長序列,并在桿狀病毒—昆蟲系統(tǒng)中表達了Bt-R<,3>蛋白胞外結構域,Western點雜交實驗顯示表達產物能有效地結合Cry1Ab,從而確證所克隆到的Bt-R<,3>是Cry1Ab的受體基因;在這些研究的基礎上,運用生物信息學手段分析了Bt-R<,3>蛋白的結構特性,Bt-R<,3>和文獻已報導的幾種Bt 受體蛋白之間的分子進化關系以及它們氨基酸序列間的保守性關系,從而更進一步地證實了Bt-R<,3>確實是C
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