水稻中一類新的AtCRE1-like基因家族成員，OsCRL4基因的初步研究.pdf

1、AtCRE1是擬南芥中的細胞分裂素受體,有四個保守的結(jié)構(gòu)域,N端的CHASE結(jié)構(gòu)域,中間組氨酸激酶結(jié)構(gòu)域和C端的兩個受體結(jié)構(gòu)域.其中CHASE結(jié)構(gòu)域是細胞分裂素的結(jié)合位點.就目前所知,細胞分裂素受體信號的感知和轉(zhuǎn)導(dǎo)都是被一個多級的磷酸接力系統(tǒng)通過雙元信號系統(tǒng)途徑進行的,雙元信號系統(tǒng)在原核和低等的真核生物中,很早就已經(jīng)被了解了.為了研究水稻中細胞分裂素受體以及其信號轉(zhuǎn)導(dǎo)路徑,通過同源序列的比對,在水稻基因組中找到了5個含有CHASE結(jié)構(gòu)域

2、的基因,分別命名為OsCRL1a,OsCRL1b,OsCRL2,OsCRL3和OsCRL4.其中OsCRL1a,OsCRL1b,OsCRL2,OsCRL3和擬南芥中的CRE1基因結(jié)構(gòu)相似,具有類似的四個保守結(jié)構(gòu)域,而OsCRL4只具有CHASE結(jié)構(gòu)域,但有一個絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶結(jié)構(gòu)域.我們對OsCRL4基因進行了研究,研究結(jié)果如下:1.對水稻中含有CHASE結(jié)構(gòu)域的蛋白家族進行同源性分析并克隆了OsCRL4基因.通過同源性分析表明O

3、sCRL1a/b與AtCRE1親緣關(guān)系最近,而OsCRL4與CRE1親緣關(guān)系最近.2.研究了OsCRL4的表達模式.通過RT-PCR,初步確定了OsCRL4基因主要在根部和幼嫩的小穗中表達,通過構(gòu)建OsCRL4::GUS的轉(zhuǎn)基因植物,研究了它的表達模式.切片分析表明,OsCRL4主要在水稻側(cè)根的韌皮部和中柱鞘表達.3.通過構(gòu)建35S∷CRL4植物表達載體來互補擬南芥突變體crel-1根伸長的表型,初步確定了具有類似于細胞分裂素受體蛋白的