29450.長(zhǎng)穗偃麥草e組染色體特異pcr標(biāo)記開發(fā)

1、揚(yáng)州大學(xué)碩士學(xué)位論文長(zhǎng)穗偃麥草E組染色體特異PCR標(biāo)記開發(fā)姓名：張超申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：遺傳學(xué)指導(dǎo)教師：陳建民20090501揚(yáng)州人學(xué)碩士學(xué)位論文理論是相符合的，非同源部分序列則有可能是長(zhǎng)穗偃麥草特異的單一序列，推測(cè)依據(jù)這樣的序列設(shè)計(jì)引物就可擴(kuò)增出該特異片段，直接通過瓊脂糖凝膠電泳觀察，方便快捷，從而將其轉(zhuǎn)化為特異PCR標(biāo)記。3長(zhǎng)穗偃麥草E組染色體特異PCR標(biāo)記的發(fā)展分別對(duì)Z2445、Z21757和Z12325三條片段設(shè)計(jì)三對(duì)引物，

2、引物組合分別編號(hào)為5E1、P4和ZCPl，理論擴(kuò)增片段大小分別為304、329和105bp。利用該三對(duì)引物分別對(duì)普通小麥中國(guó)春、長(zhǎng)穗偃麥草、中國(guó)春長(zhǎng)穗偃麥草二體附加系和相應(yīng)代換系進(jìn)行了PCR擴(kuò)增，結(jié)果顯示擴(kuò)增片段只出現(xiàn)在長(zhǎng)穗偃麥草、中國(guó)春長(zhǎng)穗偃麥草相對(duì)應(yīng)的二體附加系及代換系，大小與理論值相一致，表明位于5E染色體(Z2445)PA及7E染色體(Z21757、Z12325)上的3個(gè)E染色體特異的片段能夠被轉(zhuǎn)換為相對(duì)應(yīng)染色體的特異PCR標(biāo)記

3、。P4和ZCPI進(jìn)一步擴(kuò)增7ES和7EL的端體附加系，又能將Z21757和Z12325這兩個(gè)標(biāo)記進(jìn)一步定位到7E染色體臂。結(jié)果表明P4、ZCPl兩對(duì)引物只在7EL端體附加系中擴(kuò)增出條帶，即7E染色體長(zhǎng)臂特異的PCR標(biāo)記。對(duì)于轉(zhuǎn)化成功的長(zhǎng)穗偃麥草5E和7E染色體特異PCR標(biāo)記，經(jīng)多次驗(yàn)證重復(fù)性好，擴(kuò)增穩(wěn)定，操作便捷，花費(fèi)低，尤其適合無相關(guān)基因組序列信息的情況下需要發(fā)展分子標(biāo)記?？梢岳闷鋪龛b定小麥染色體工程育種中的易位系或漸滲系材料中二倍