偃麥草屬E組及St組染色體編碼的高分子量谷蛋白基因的分子克隆.pdf

1、中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)博士學(xué)位論文偃麥草屬E組及St組染色體編碼的高分子量谷蛋白基因的分子克隆姓名：唐朝暉申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：博士專(zhuān)業(yè)：作物遺傳育種學(xué)指導(dǎo)教師：劉廣田孫善澄2002.6.1基類(lèi)型。2普通小麥背景中中問(wèn)偃麥草高分子量谷蛋白基因的克隆八倍體小偃麥中1、中2、中3、中4、中5，除具有普通小麥A、B、D染色體組外，還有中間偃麥草的一個(gè)染色體組，含有小麥育種可利用的最好亞基組合。在綠中1、中3、中4、中5以及中間偃麥草中，都擴(kuò)增出一條1074bp

2、的DNA片段，認(rèn)定這條高分子量谷蛋白基因是中間偃麥草所特有的，命名該基因?yàn)橹虚g偃麥草高分子量谷蛋l(fā)芻GluElh基因，編碼的亞基為Eh。Eh亞基是一種Y型亞基，氨基酸序列包括一個(gè)有21個(gè)氨基酸殘基的信號(hào)肽，～個(gè)有105個(gè)氨基酸殘基的N末端保守區(qū)，一個(gè)有42個(gè)氨基酸殘基C末端保守區(qū)，一個(gè)有188個(gè)氨基酸殘基的重復(fù)區(qū)。在重復(fù)區(qū)中含有21個(gè)六肽(PGQGQQ)，4個(gè)九肽(GYYPTsLQQ)，以及位于重復(fù)區(qū)起始端的十～肽(GYYPsVTSPQ

3、Q)和十二肽(GSYYPGQASPQQ)和重復(fù)末端的三肽(GYD)。Eh亞基在系統(tǒng)進(jìn)化中，與Dyl0、Dyl2、Dyl2、A，、By9、Ry和Cy7個(gè)亞基的親緣關(guān)系較遠(yuǎn)。3二倍體長(zhǎng)穗偃麥草高分子量谷蛋白基因的克隆在二倍體長(zhǎng)穗偃麥草P1276709中，利用高分子量谷蛋白基因兼并性引物P1、P2，克隆到一條全長(zhǎng)含1155個(gè)核替酸的高分子量谷蛋白編碼基因，該基因命名為二倍體長(zhǎng)穗偃麥草高分子量谷蛋白的GIuE1b基因。推導(dǎo)的亞基(Eb)是一個(gè)Y

4、型亞基，氨基酸序列包括一個(gè)有21個(gè)氨基酸殘基的信號(hào)肽，一個(gè)有105個(gè)氨基酸殘基的N末端保守區(qū)，一個(gè)有42個(gè)氨基酸殘基的c末端保守區(qū)，一個(gè)有215個(gè)氨基酸殘基的重復(fù)區(qū)。在重復(fù)區(qū)中含有24個(gè)六肽(PGQGQQ)，5個(gè)九肽(GYYPTSLQQ)，以及位于重復(fù)區(qū)起始端的十一肽(GYYPSVTSPQQ)和十二肽(GSYYPCQASPQQ)和重復(fù)末端的三肽(GYD)。Eb亞基與中間偃麥草Eh亞基親緣關(guān)系較近，而與OylO、Dyl2、Dyl2t、Ay

5、、B)，9、Ry和Cy7個(gè)亞基的親緣關(guān)系較遠(yuǎn)。在二倍體長(zhǎng)穗偃麥草P1469212中，利用兼并性引物Pl、P2。克隆到一條全長(zhǎng)編碼區(qū)含1224個(gè)核苷酸的高分子量谷蛋白基因，該基因命名為二倍體長(zhǎng)穗偃麥草高分子量谷蛋白的OluEle基因。推導(dǎo)的亞基(Ec)是一個(gè)X型亞基，氨基酸序列包括一個(gè)有21個(gè)氨基酸殘基的信號(hào)肽，一個(gè)有86個(gè)氨基酸殘基的N末端保守區(qū)，一個(gè)有42個(gè)氨基酸殘基c末端保守區(qū)，一個(gè)有257個(gè)氨基酸殘基的重復(fù)區(qū)。在重復(fù)區(qū)中含有26個(gè)