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1、百薩偃麥草(Thinopyrum bessarabicum Love,2n=2x=14,JJ or EbEb)攜有多種抗病和抗逆基因,是小麥改良的重要基因資源。為轉(zhuǎn)移、定位和利用這些基因,南京農(nóng)業(yè)大學(xué)已經(jīng)選育了多個(gè)二體附加(代換)系,但尚未選育出涉及完整1J染色體的二體附加或代換系。
本研究在前人工作的基礎(chǔ)上,對(duì)涉及1J和6J染色體多重添加系的自交后代進(jìn)行分子標(biāo)記、貯藏蛋白分析和細(xì)胞學(xué)鑒定,選育出DS1J(1B)及6個(gè)涉及
2、1J的易位系。從708個(gè)共線性標(biāo)記中篩選出47個(gè)1J染色體專(zhuān)化標(biāo)記。利用這些標(biāo)記,對(duì)選育的1J變異體進(jìn)行了分析,初步明確了2個(gè)易位系分別為T(mén)1JS-W.W和TW.W-1JL,并將47個(gè)標(biāo)記分別定位在4個(gè)區(qū)段,其中5個(gè)定在長(zhǎng)臂、2個(gè)定位在短臂末端、24個(gè)定位在短臂中部,其余定位于著絲粒區(qū)段。比較分析表明百薩偃麥草染色體1J與水稻染色體R2、短柄草Bd3的相應(yīng)區(qū)段具有共線性。
前人研究發(fā)現(xiàn),百薩偃麥草染色體5J攜有耐鹽主基因,
3、達(dá)瓦頓珠(2009)已選育出DA5J、MA5J和DS5J(5A)等附加代換系,但尚未選育出相應(yīng)的易位特別是小片段易位系,從而影響耐鹽等基因的精細(xì)定位。本研究進(jìn)一步篩選出32個(gè)5J專(zhuān)化標(biāo)記。分子標(biāo)記輔助選擇結(jié)合細(xì)胞遺傳分析,從MA5J自交后代中選育出兩種自發(fā)易位,一種為T(mén)5JS.5JL-W,易位斷點(diǎn)位于5JL近端部,小麥染色體僅占易位染色體的1/5,另一種為整臂易位TW.5JL;利用60Co-γ射線(總劑量1200 rad)輻射DS5J(
4、5A)植株,并與中國(guó)春進(jìn)行正反交獲得M1代種子,通過(guò)GISH分析,從607個(gè)M1單株中鑒定出36個(gè)變異單株,涉及50多種變異類(lèi)型,包括缺失、端體、大片段易位、小片段易位和插入易位等,易位(缺失)斷點(diǎn)涉及5J染色體的不同區(qū)段。利用6個(gè)僅包含一種5J變異染色體的小麥為試材,對(duì)32個(gè)5J專(zhuān)化分子標(biāo)記進(jìn)行了物理定位,其中5個(gè)定位在短臂、9個(gè)定位在長(zhǎng)臂近著絲粒區(qū)段、15個(gè)定位在長(zhǎng)臂末端。比較分析證明百薩偃麥草5J染色體與水稻染色體R2、短柄草Bd
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