25696.魚類kisspeptin與gnih信號系統(tǒng)的鑒定及其在生殖調(diào)控中的作用研究

1、中山大學(xué)博士學(xué)位論文魚類kisspeptin與gnih信號系統(tǒng)的鑒定及其在生殖調(diào)控中的作用研究姓名：李水生申請學(xué)位級別：博士專業(yè)：生理學(xué)指導(dǎo)教師：林浩然20100608李水生中山人學(xué)博I：學(xué)位論文2010年6月同線性結(jié)構(gòu)；根據(jù)預(yù)測出來的序列，我們在斑馬魚中克隆了gnih基因以及三個潛在的gnih受體基因(gnihrl、gnihr2、gnihr3)的cDNA序列全長。同源比對結(jié)果顯示：GnIH的氨基酸序列在不同物種中存在較大的差異。Gnl

2、H受體的序列同源比對和進化樹分析都表明斑馬魚三個gnihrs屬于gnih的受體。組織表達模式研究顯示：gnih與gnihrs主要在斑馬魚腦中表達，提示它們的作用區(qū)域主要在腦區(qū)。此外，我們還研究了gnih與gnihrs在斑馬魚胚胎發(fā)育過程的表達變化。gnih的表達在5原基期首次被檢測到，之后一直維持在相對恒定的水平；而三個gnihrs在整個胚胎和早期發(fā)育過程都有表達。3運用realtimePCR方法，我們檢測了kisses、gpr54s、

3、gnih與gnihrs在斑馬魚青春期發(fā)育過程中的表達變化。兩個kiss基因在青春期啟動前表達開始上升，但它們的表達模式又有所不同；而兩個gpr54s的表達模式呈現(xiàn)互補的趨勢；提示它們在青春期發(fā)育的過程中可能具有不同的功能。gnih與gnihrl的表達在斑馬魚青春期發(fā)育過程中沒有顯著變化，而gnihr2，gnihr3在卵黃生成中期顯著升高，其中的分子機制目前還不是很了解。4通過化學(xué)合成金魚kisspeptins與斑馬魚gnih的核心肽，在

4、體注射成熟的雌性金魚，發(fā)現(xiàn)kissl能顯著刺激金魚LH的分泌，而kiss2不能；在較高劑量，gnih亦能有效地抑制金魚LH的分泌。然而，在離體實驗中，2種kisspeptin與gnih對金魚垂體細胞LH的分泌均沒有顯著的影響，提示kisspeptins與gnih對金魚的LH調(diào)控可能發(fā)生在下丘腦水平。5通過切除金魚的卵巢，運用realtimePCR檢測下丘腦kissl、kiss2與gnih的表達。研究發(fā)現(xiàn)：卵巢切除后下丘腦kissl基因的