25394.家蠶赤蟻突變的分子定位及淡赤蟻(ch39;p)的分子基礎初探

1、西南大學碩士學位論文家蠶赤蟻突變的分子定位及淡赤蟻（ch）的分子基礎初探姓名：黃永燕申請學位級別：碩士專業(yè)：遺傳學指導教師：代方銀魯成20100501西南大學碩學位論文篩選，找劍了10對在兩個親本間表現(xiàn)多態(tài)性的引物，再用這10對引物對2個親本、Fl代和連鎖分析組合BClF群體的20個個體(10個正常個體和lO個表現(xiàn)赤蟻的個體)，共23個個體基因組DNA進行PCR擴增和PAGE電泳檢測，篩選到5對與標記基因血連鎖的SSR標記：S0903、

2、S0904、S0907、S0908和S0910。用這5對SSR標記對億突變基因的定位分析組合BClM群體的100個個體基因組DNA進行SSRPCR分析，經過數據統(tǒng)計和分析，利用作圖軟件得到突變基因和與它們連鎖的5個SSR標記的連鎖圖。連鎖SSR標記與突變基因腸在連鎖圖上的順序依次為：S0907、Ia、S0904、S0903、S0908、S0910。連鎖圖的遺傳距離是444cM，距離腸最近的SSR標記是S0904，圖距為10eM。(3)隱

3、性赤蟻如基因的分子定位利用屬于家蠶第13連鎖群的共11對SSR引物在定位系統(tǒng)親本Dazaoch和近交系C108間篩選得到了7對有多態(tài)性的引物。用兩個親本、F1代和BClF代共23個個體基因組進行了連鎖驗證，找到了5對與標記基因連鎖的SSR標記：S1308、S1309、S131l、S1312和S2213。用這5對標記對幽的定位分析組合BClM群體的166個個體基因組DNA進行SSRPCR分析，經過數據統(tǒng)計和分析，將砌基因定位于標記S130

4、9和S2213之間，距離如最近的標記是S1309，圖距為73eM；eh距離標記S2213遺傳距離為91eM。(4)淡赤蟻(∥)的分子基礎初探在已知赤蟻突變嘲與yellow基因有關的情況下，根據NCBI上yellow基因的CDS序列跨ORF設計引物擴增等位基因淡赤蟻(ohp)eDNA中yellow基因，得到兩種剪接方式的表達?？寺〔y序，chptypel屬于插入型突變，在第3外顯子前插入不規(guī)律的一段序列，由TAA引起翻譯提前終止。c礦ty

5、pe2屬于缺失型突變，由第2外顯子和第4外顯子直接相連，缺失整個第3外顯子共189bp(終止密碼子與野生型相同)。其中，typel為淡赤蟻所特有的剪接方式，通過對其編碼氨基酸的序列、糖基化位點分析、功能域預測及高級結構等分析，初步推測其為導致淡赤蟻表型的分子基礎。實驗結果表明，yellow基因從家蠶胚胎期的12h就開始表達。yellow基因在家蠶的頭部中高量表達，此處為淡赤蟻與正常大造表型差異最明顯的地方，說明yellow基因參與了家蠶