1483.microrna在果蠅toll信號免疫響應(yīng)中的調(diào)控作用研究

1、索取號：QZ亙曼：!Z：!!≥fJIJlIJIIIJlllllllllIIllJIIfY3310396南京師勉犬掌博士學位論文凰microRNA在果蠅Toll信號免疫響應(yīng)中的調(diào)控作用研究研究生：指導(dǎo)教師：李盛杰許曉風教授馬飛教授培養(yǎng)單位：生命科學學院一級學科：二級學科：完成時間：答辯時間：生物學動物學2017年2月28日2017年5月20日摘要摘要果蠅(Drosophilamelanogaster)作為重要的模式動物，其便捷的遺傳可操作

2、性、完備的基因組注釋以及豐富的突變株種類，為研究果蠅免疫穩(wěn)態(tài)的調(diào)控機制提供了極大的便利，也為研究昆蟲天然免疫與人類天然免疫之間的關(guān)系架起了橋梁。果蠅先天免疫響應(yīng)主要包括兩個不同的信號通路：Toll和Imd信號通路，這兩個信號通路分別與哺乳動物先天免疫應(yīng)答過程中的TLR信號通路和TNF一值信號通路具有同源性，表明果蠅與哺乳動物在先天免疫調(diào)控途徑上存在著共同的進化起源。因此，深入開展果蠅免疫調(diào)控機制的研究，為進一步揭示其他昆蟲抗病原菌感染的

3、作用機制，以及闡明哺乳動物先天性免疫的調(diào)控機制等都具有重要的理論和實踐意義。microRNA(miRNA)是與轉(zhuǎn)錄后基因沉默相關(guān)的一類長度為21—25nt的非編碼小RNA，在基因表達調(diào)控以及維持生物體內(nèi)穩(wěn)態(tài)過程中都起著極其重要的作用。當免疫應(yīng)答被過度激活或不足時，將會對生物個體造成不同程度的損傷。因此，生物體必須具備相應(yīng)的保護機制來維持免疫穩(wěn)態(tài)，以防止免疫應(yīng)答因過度或不足所造成的傷害。果蠅T011信號通路作為果蠅免疫應(yīng)答的重要通路之一，

4、其調(diào)控過程必定是一個十分精細的過程，涉及的調(diào)控因子可能既有各種信號通路蛋白、轉(zhuǎn)錄因子，亦有多種miRNA參與其中。然而，目前有關(guān)miRNA在果蠅Toll信號通路中的調(diào)控作用范圍及調(diào)控作用機制仍不十分清晰，需作進一步的深入研究。為此，本論文圍繞miRNA在果蠅Toll信號通路中的調(diào)控機制這一重要科學問題，開展了較為系統(tǒng)的研究工作：1利用smallRNA—seq技術(shù)，考察了革蘭氏陽性菌藤黃微球菌(Mluteus)感染野生型果蠅(W1118)

5、3h、12h和24h后的果蠅及未感染的野生型果蠅(W1118，對照)的miRNA表達情況，共計鑒定出445個果蠅miRNA；感染Mluteus3h和12h后的果蠅與對照組果蠅比較，分別出現(xiàn)了6和14個差異表達的miRNA，而感染24h后的果蠅差異表達的miRNA數(shù)量則顯著增加到86個。2為了對潛在的免疫應(yīng)答相關(guān)的miRNA進行篩選和鑒定，利用果蠅全身高表達系統(tǒng)Gal80t5tubGal4，構(gòu)建了41株UAS—miRNAlines果蠅高表