痰液基薄層細胞學檢查和沉渣切片法在肺癌中的臨床診斷價值.pdf

1、中國醫(yī)科大學碩士學位論文痰液基薄層細胞學檢查和沉渣切片法在肺癌中的臨床診斷價值姓名：任美思申請學位級別：碩士專業(yè)：病理學與病理生理學指導教師：李建華20090401美國新柏氏超薄細胞檢測儀，ThinPrep保存液及處理液，95％酒精，石蠟，脫水機，奧林帕斯顯微鏡，福建邁新公司單克隆抗體CKH(克隆號：34BE12)，CK7(克隆號：OVTL12／30722)，WrF1(克隆號：8G7G3／1)，NSE(克隆號：E27)等。二、方法1、實

2、驗方法：(1)傳統(tǒng)涂片將痰液制成傳統(tǒng)涂片4張，巴氏染色。(2)TCT的制備將痰液的一小部分直接加入30ml清洗液和7～8滴消化液(1，4二硫蘇糖醇)后振蕩約10分鐘。離心，2500轉(zhuǎn)／分，5分鐘。棄上清液，將少許沉淀加入到盛有保存液的小瓶中，靜置10分鐘后，用ThinPrep制成薄層細胞涂片，95％的酒精固定10分鐘，巴氏染色。(3)痰沉渣切片將剩余的痰液倒入試管中，加入95％的酒精，吹打均勻后離心，2500轉(zhuǎn)／分，5分鐘。取出沉渣，石

3、蠟包埋，49in連續(xù)切片。選2張切片進行HE染色。(4)免疫細胞化學染色對于通過傳統(tǒng)涂片，TCT和痰沉渣切片法仍不能分型的病例進行免疫細胞化學染色。石蠟切片(4“m)后脫蠟水化。滴加過氧化物酶阻斷溶液(試劑A)，室溫孵育10分鐘，PBS沖洗；滴加非免疫性動物血清(試劑B)，室溫孵育lO分鐘；滴加一抗，室溫孵育90分鐘，PBS沖洗；滴加生物素標記的二抗(試劑c)，室溫孵育20～30分鐘，PBS沖洗；滴加鏈霉素抗生物素過氧化物酶溶液(試劑D