P-選擇素在糖尿病腎病發(fā)病的作用和干預(yù)治療.pdf

1、研究背景和目的:糖尿?。―M）是常見病和多發(fā)病，糖尿病腎?。―N）已成為終末期腎衰的主要原因之一，目前近40％的透析患者是DN。研究發(fā)現(xiàn)，P-選擇素及其介導(dǎo)的內(nèi)皮損傷和血小板聚集參與了DN的發(fā)生與發(fā)展。高血糖可導(dǎo)致內(nèi)皮細(xì)胞高度表達(dá)P-選擇素及白細(xì)胞滾動(dòng)、粘附增強(qiáng)，胰島素能明顯抑制P-選擇素表達(dá)及其介導(dǎo)的白細(xì)胞粘附，故推測DM微血管病變與P-選擇素介導(dǎo)的細(xì)胞粘附、血栓形成及促進(jìn)炎癥有關(guān)。研究發(fā)現(xiàn)，DN患者血液的P-選擇素的表達(dá)水平顯著高于

2、不合并DN的DM患者，并發(fā)現(xiàn)P-選擇素mRNA的表達(dá)亦存在該趨勢(shì)。 本課題目的是擬利用動(dòng)物實(shí)驗(yàn)觀察糖尿病腎病大鼠腎臟組織的病理改變、P-選擇素表達(dá)及二者相關(guān)性，同時(shí)探討低分子肝素的干預(yù)治療對(duì)糖尿病腎病腎臟的保護(hù)作用, 為糖尿病腎病發(fā)病機(jī)制研究和特異性治療提供新的理論依據(jù)。 方法:用STZ方法構(gòu)建糖尿病腎病大鼠模型后隨機(jī)分為正常對(duì)照組、糖尿病組和大劑量、小劑量低分子肝素干預(yù)組。用低分子肝素干預(yù)糖尿病腎病大鼠。于應(yīng)用低分子肝

3、素前、后第4、8、12周分別測定四組大鼠的體重、收集24小時(shí)尿測定尿蛋白總量、肌酐、尿白蛋白，采血測定血糖和腎功能，處死大鼠前主動(dòng)脈采血加測血脂、凝血功能、并留取腎臟。應(yīng)用ELISA 方法檢測各組大鼠血P-選擇素水平，應(yīng)用免疫組化方法檢測腎組織P-選擇素蛋白表達(dá)水平，P-選擇素基因表達(dá)水平檢測應(yīng)用實(shí)時(shí)熒光定量PCR方法。并觀察各組大鼠腎臟組織病理學(xué)改變。 結(jié)果:實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)，糖尿病組和低分子肝素治療組大鼠腎重、腎重/體重指數(shù)以及2

4、4h尿微量白蛋白、蛋白定量均高于正常組大鼠，其差異有顯著性；光鏡發(fā)現(xiàn)大鼠腎組織中腎小球基底膜增厚、系膜增生等病理改變。免疫組化分析提示正常組大鼠腎組織P-選擇素呈弱陽性表達(dá)；糖尿病組和低分子肝素治療組大鼠腎小球和腎小管P-選擇素表達(dá)高于正常對(duì)照組，其差異有顯著性。糖尿病大鼠腎組織P-選擇素mRNA的表達(dá)水平明顯高于正常對(duì)照組。低分子肝素治療組大鼠腎重、腎重/體重指數(shù)、尿蛋白、腎功能及P-選擇素的表達(dá)水平均低于糖尿病組，腎組織病理學(xué)改變程

5、度亦減輕。 結(jié)論: 1.在糖尿病腎病的發(fā)生發(fā)展過程中存在著P-選擇素表達(dá)和含量的變化。 2.尿蛋白、腎功能以及腎臟肥大程度均與血液以及腎臟局部P-選擇素表達(dá)相關(guān)，說明P-選擇素介導(dǎo)的細(xì)胞粘附、血栓形成及促進(jìn)炎癥與糖尿病腎病發(fā)病有關(guān)。 3.低分子肝素可以延緩糖尿病大鼠腎臟病變的發(fā)生發(fā)展，降低腎臟肥大、減少尿蛋白的排泄，延緩腎功能的衰減，可能與其抑制P-選擇素的表達(dá)有關(guān)。且不依賴于血糖、血脂水平的變化。