氟非尼酮對大鼠肝星狀細(xì)胞增殖作用的觀察.pdf

1、目的:觀察AKF-PD對大鼠肝星狀細(xì)胞增殖的影響，初步探討其機(jī)制。
　　 方法:
　　 1.原位灌流法從S-D大鼠肝臟內(nèi)分離原代大鼠肝星狀細(xì)胞。
　　 2.分離培養(yǎng)14天的原代肝星狀細(xì)胞分為:正常組、模型組(10ng/ml PDGF)、200μg/ml AKF-PD治療組(10ng/ml PDGF+200μg/ml AKF-PD)、400μg/ml AKF-PD治療組(10ng/ml PDGF+400μg/mlA

2、KF-PD)，藥物預(yù)處理24小時后加入PDGF10ng/ml繼續(xù)培養(yǎng)24小時，MTT法檢測AKF-PD對大鼠肝星狀細(xì)胞增殖的影響。
　　 3.將分離培養(yǎng)14天的原代肝星狀細(xì)胞分為正常組、模型組(10ng/ml PDGF)、AKF-PD治療組(10ng/ml PDGF+400μg/ml AKF-PD)、PFD治療組(10ng/ml PDGF+400μg/ml PFD)。藥物預(yù)處理24小時后加入PDGF10ng/ml繼續(xù)培養(yǎng)24小時

3、，提取細(xì)胞蛋白，Wesern Blot法檢測CyclinD1、CyclinE、P27Kipl蛋白表達(dá)。
　　 結(jié)果:
　　 1.與正常組比較，模型組肝星狀細(xì)胞吸光度值顯著增加;與模型組比較，不同濃度的AKF-PD治療組肝星狀細(xì)胞吸光度值均明顯下降，且400μg/ml AKF-PD治療組較200μg/ml AKF-PD治療組下降明顯。
　　 2.與正常組比較，模型組肝星狀細(xì)胞CyclinD1、CyclinE表達(dá)明顯