牛腔前卵泡體外培養(yǎng)研究.pdf

1、本實(shí)驗(yàn)以從屠宰場(chǎng)收集到的黃牛卵巢中分離得到的腔前卵泡卵母細(xì)胞為材料，采用普通微滴法和多聚賴氨酸鋪層法對(duì)黃牛腔前卵泡進(jìn)行體外培養(yǎng)研究，結(jié)果如下：　　比較了機(jī)械分離法和酶結(jié)合機(jī)械法分離腔前卵泡卵的效果，用機(jī)械分離法每個(gè)卵巢回收的卵泡數(shù)平均為12.6±3.6個(gè)(共分離卵巢15個(gè))，極顯著低于酶結(jié)合機(jī)械法的28.2±8.6個(gè)(共分離卵巢15個(gè))(P＜0.01)；而回收的正常卵泡兩種方法間差異不顯著(P＞0.05)。綜合比較表明分離腔前卵泡卵的

2、效果酶結(jié)合機(jī)械法優(yōu)于機(jī)械法。　　實(shí)驗(yàn)篩選了適宜的基礎(chǔ)培養(yǎng)液和牛腔前卵泡體外培養(yǎng)的方法。　　在實(shí)驗(yàn)篩選出的適宜基礎(chǔ)培養(yǎng)液中添加EGF50ng/L、IGF-175ng/L時(shí)腔前卵泡的存活率最高，達(dá)到66.4％，極顯著高于對(duì)照組的44.6％(P＜0.01)，而卵母細(xì)胞直徑的平均增幅也達(dá)到最大(45.92μm)，顯著高于對(duì)照組的28.56m(P＜0.05)。結(jié)果表明，聯(lián)合添加EGF、IGF-1能夠促進(jìn)腔前卵泡體外培養(yǎng)的存活率和卵母細(xì)胞的生長(zhǎng)

3、?！　≡趯?shí)驗(yàn)篩選出的適宜基礎(chǔ)培養(yǎng)液中添加了不同劑量的FSH、17β-E2以探討其對(duì)牛腔前卵泡體外培養(yǎng)的影響?！　≡趯?shí)驗(yàn)篩選出的適宜基礎(chǔ)培養(yǎng)液中添加50mg/LEGF+75mg/LIGF-1+0.25mg/LFSH+1mg/L17β-E2體外培養(yǎng)腔前卵泡，結(jié)果表明，培養(yǎng)12天卵母細(xì)胞直徑平均增幅達(dá)到62.84μm，而培養(yǎng)12天后腔前卵泡成腔率為8.76％。說(shuō)明DMEM+5.00mg/胰島素+5.00mg/L轉(zhuǎn)鐵蛋白+5.00μg/L硒