異氟醚對(duì)老齡大鼠認(rèn)知功能及腦內(nèi)神經(jīng)細(xì)胞凋亡的影響.pdf

1、目的：麻醉手術(shù)后認(rèn)知功能障礙的發(fā)生率至今未見(jiàn)明顯改善，究其原因在于發(fā)生機(jī)制仍未闡明。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)觀察吸入不同濃度的異氟醚對(duì)老齡大鼠學(xué)習(xí)記憶能力的影響，并檢測(cè)老鼠大腦海馬和皮層神經(jīng)細(xì)胞凋亡的情況，從而為探討異氟醚導(dǎo)致老鼠學(xué)習(xí)記憶功能改變的機(jī)理提供幫助，以期進(jìn)一步為臨床上安全應(yīng)用異氟醚提供指導(dǎo)。 方法：篩選出符合實(shí)驗(yàn)要求的69只22-24月齡老齡SD大鼠，隨機(jī)分為3組：吸氧組、1.2％異氟醚吸入組、1.8％異氟醚吸入組。吸氧組老齡SD

2、大鼠21只，只吸入含40％氧氣的空氧混合氣體3小時(shí)；1.2％Iso組和1.8％Iso組老齡SD大鼠各24只均以3％濃度的異氟醚誘導(dǎo)，待翻正反射消失后(約10±2min)再以相應(yīng)濃度(1.2％或1.8％)維持3小時(shí)，麻醉過(guò)程中其吸入氧流量為2L/min，監(jiān)測(cè)氧濃度為40％。同時(shí)隨機(jī)抽取3只大鼠行股動(dòng)脈穿刺置管持續(xù)監(jiān)測(cè)生命體征，待麻醉結(jié)束后任其自然蘇醒。之后將每組大鼠各隨機(jī)分為兩部分：一部分單純進(jìn)行行為學(xué)觀察(每組12只)；另一部分進(jìn)行凋亡

3、細(xì)胞檢測(cè)(每組9只)。從三組大鼠中各隨機(jī)抽取出的12只，從24小時(shí)開(kāi)始連續(xù)7天對(duì)其進(jìn)行Morris水迷宮行為學(xué)觀察，第1-6天每天訓(xùn)練4次，記錄其到達(dá)平臺(tái)所需的時(shí)間即平均逃避潛伏期，作為其該時(shí)段的學(xué)習(xí)成績(jī)，并于第7天撤去平臺(tái)進(jìn)行空間探索實(shí)驗(yàn)，觀察老鼠學(xué)習(xí)記憶能力的變化。每組余下9只大鼠進(jìn)行凋亡細(xì)胞檢測(cè)，于麻醉結(jié)束后24小時(shí)、72小時(shí)和7天分別從每組老鼠中各隨機(jī)抽取3只，進(jìn)行灌注、取腦、固定、切片(包含海馬)，再應(yīng)用TUNEL法進(jìn)行原位末

4、端標(biāo)記凋亡染色從而檢測(cè)大鼠腦內(nèi)海馬和皮層神經(jīng)細(xì)胞凋亡的情況。 結(jié)果： 1、水迷宮實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，異氟醚吸入組老鼠第2、3天平均逃避潛伏期1.2％和1.8％異氟醚吸入組分別為[(44.16±17.91)、(26.80±11.51)]和[(47.41±20.94)、(27.08±11.64)秒]，均較吸氧組[分別為(23.61±13.91)、(14.87±8.37)秒]延長(zhǎng)(P<0.05)，其中以第2天差異最為顯著(P<0.0

5、1)，而異氟醚吸入不同濃度組問(wèn)無(wú)差異顯著性；第7天檢測(cè)的空間探索實(shí)驗(yàn)三組均無(wú)差異。 2、神經(jīng)細(xì)胞凋亡檢測(cè)結(jié)果顯示，1.2％和1.8％異氟醚吸入麻醉組老鼠海馬CA1、CA2、CA3各區(qū)神經(jīng)細(xì)胞凋亡率與吸氧組比較均無(wú)差異顯著性(P>0.05)；而麻醉后24小時(shí)，1.2％和1.8％異氟醚吸入麻醉組老鼠大腦皮層神經(jīng)細(xì)胞凋亡率分別為[(6.09±1.42)％、(8.42±1.30)％]；72小時(shí)更加明顯[分別為(12.36±1.38)％、

6、(14.34±1.27)％]；7天時(shí)較前減少[分別為(5.84±1.26)％、(7.23±1.08)％]，均多于吸氧組[分別為(0.15±0.31)％、(0.17±0.30)％、(0.12±0.26)％]有顯著性差異(P<0.01)。1.8％異氟醚吸入組老鼠于麻醉后24小時(shí)、72小時(shí)、7天皮層區(qū)凋亡細(xì)胞率多于1.2％異氟醚吸入組(P<0.01)。 結(jié)論：異氟醚吸入全身麻醉可引起老齡大鼠學(xué)習(xí)記憶能力短期下降，于麻醉結(jié)束后第4天趨于