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文檔簡介
1、目的:
檢測TLR-2,TLR-4,TLR-7以及MyD88在經(jīng)典的復(fù)發(fā)性自然流產(chǎn)(RSA)小鼠模型的胎盤組織和蛻膜組織中的表達水平,并與正常妊娠對照小鼠模型進行對比,探討在RSA中,TLRs-MyD88通路介導(dǎo)的天然免疫失衡機制的作用。
方法:
1.采用免疫細(xì)胞化學(xué)法檢測TLR-2,TLR-4,TLR-7在RSA組小鼠和正常妊娠對照組胎盤組織和蛻膜組織中的表達,用醫(yī)學(xué)彩色圖像分析系統(tǒng)(Image-Pro
2、Plus6.0)進行圖像分析,每張切片高倍鏡下隨機取5個視野,測量陽性細(xì)胞表達的平均光強度值,并進行統(tǒng)計學(xué)分析;
2.采用Western Blot法檢測TLR-2,TLR-4,TLR-7以及MyD88在RSA小鼠模型和正常妊娠對照組小鼠的胎盤組織和蛻膜組織中的蛋白表達水平,并進行統(tǒng)計學(xué)分析;
3.采用實時熒光定量PCR檢測RSA組小鼠和正常妊娠對照組小鼠的胎盤組織和蛻膜組織中TLR-2,TLR-4,TLR-7以及My
3、D88在mRNA水平的表達。
結(jié)果:
1.TLR-2,TLR-4,TLR-7在RSA組小鼠和對照組孕鼠的胎盤組織的滋養(yǎng)細(xì)胞和蛻膜組織的基質(zhì)細(xì)胞及腺上皮細(xì)胞中均有表達,且主要表達于細(xì)胞胞漿,陽性細(xì)胞胞漿均被染成棕黃色,且RSA組小鼠胎盤組織和蛻膜組織中,TLRs的表達強度均明顯高于正常妊娠對照組小鼠,其差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。
2.TLR-2,TLR-4,TLR-7和MyD88在蛋白水平的表達上,
4、RSA組小鼠的胎盤組織和蛻膜組織均明顯高于正常妊娠對照組小鼠,其差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。
3.RSA組小鼠胎盤組織和蛻膜組織中TLR-2,TLR-4,TLR-7 mRNA的相對表達水平較正常妊娠對照組下調(diào),其差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。而MyD88 mRNA的相對表達水平較正常妊娠對照組上調(diào),其差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。
結(jié)論:
TLR-2,TLR-4,TLR-7和MyD88在
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