β-欖香烯抑制高氧誘導小鼠視網(wǎng)膜新生血管的實驗研究.pdf

1、目的：
　　 視網(wǎng)膜新生血管是多種視網(wǎng)膜血管源性疾病如增生型糖尿病視網(wǎng)膜病變、視網(wǎng)膜靜脈阻塞、早產(chǎn)兒視網(wǎng)膜病變等共同的病理生理改變基礎,是導致患者視力減退甚至致盲的主要原因之一。對視網(wǎng)膜新生血管的治療,臨床尚無肯定有效的治療方法。因此,解析視網(wǎng)膜新生血管發(fā)生發(fā)展的分子機制,并探索一種新型的、微損傷的治療新生血管的方法已成為眼科研究的難點和熱點。本實驗分別采用玻璃體內(nèi)注射和球后注射p.欖香烯的方法治療高氧誘導的小鼠視網(wǎng)膜新生血管模

2、型,通過觀察H-E染色、視網(wǎng)膜鋪片及VEGF免疫組織化學染色等指標的變化,探討中藥單體β-欖香烯對高氧誘導小鼠視網(wǎng)膜新生血管發(fā)生發(fā)展的抑制作用。
　　 方法：
　　 將64只鼠齡為7d的C57BL/6J小鼠隨機分為4組:空氣對照組、高氧對照組、玻璃體內(nèi)注射組及球后注射組。建立高氧誘導的視網(wǎng)膜新生血管小鼠模型,分別對玻璃體內(nèi)注射組玻璃體內(nèi)注射1μlβ-欖香烯;球后注射組球后注射2μlβ-欖香烯。視網(wǎng)膜組織切片行HE染色,鏡

3、下觀察突破視網(wǎng)膜內(nèi)界膜的血管內(nèi)皮細胞核情況。ADP酶法視網(wǎng)膜鋪片,測量視網(wǎng)膜無灌注區(qū)面積和用鐘點法測量視網(wǎng)膜新生血管數(shù)量。VEGF免疫組織化學染色,測量累積光密度,觀察VEGF的變化情況。統(tǒng)計結果均以均數(shù)±標準差表示,用單因素方差分析(one-wayANOVA)進行多組間變量分析比較,均用SPSS17.0軟件進行統(tǒng)計分析。
　　 結果：
　　 1.HE染色各組突破視網(wǎng)膜內(nèi)界膜的血管內(nèi)皮細胞核數(shù)分別為空氣對照組(0.90±

4、1.52)個、高氧對照組(27.15±9.83)個、玻璃體內(nèi)注射組(2.90±2.02)個、球后注射組(13.33±4.83)個,統(tǒng)計學處理結果表明玻璃體內(nèi)注射組及球后注射組分別與高氧對照組相比差異有統(tǒng)計學意義(p<0.05);玻璃體內(nèi)注射組與球后注射組相比差異有統(tǒng)計學意義(p<0.05)。
　　 2.視網(wǎng)膜鋪片各組新生血管鐘點數(shù)分別為空氣對照組未見新生血管、高氧對照組(8.00±1.26)、玻璃體內(nèi)注射組(3.67±0.82)

5、、球后注射組(6.12±1.17)。玻璃體內(nèi)注射組及球后注射組分別與高氧對照組相比差異有統(tǒng)計學意義(p<0.05);玻璃體內(nèi)注射組與球后注射組相比差異有統(tǒng)計學意義(p<0.05)。
　　 3.各組視網(wǎng)膜鋪片無灌注區(qū)面積分別為空氣對照組未見無灌注區(qū)、高氧對照組(385031.67±56024.13)、玻璃體內(nèi)注射組(224679.17±54853.04)、球后注射組(307442.67±58947.96)。玻璃體內(nèi)注射組及球后注射

6、組分別與高氧對照組相比差異有統(tǒng)計學意義(p<0.05);玻璃體內(nèi)注射組與球后注射組相比差異有統(tǒng)計學意義(p<0.05)。
　　 4.VEGF免疫組織化學染色各組累積光密度值分別為空氣對照組(32.17±20.98)、高氧對照組(144.04±65.72)、玻璃體內(nèi)注射組(55.56±36.69)。統(tǒng)計學處理三者差異相比有統(tǒng)計學意義(p<0.05)。
　　 結論：
　　 1.β-欖香烯注射乳可以抑制高氧誘導小鼠視網(wǎng)