人非小細(xì)胞肺癌組織中p63基因的轉(zhuǎn)錄表達水平研究.pdf

1、第三軍醫(yī)大學(xué)碩士學(xué)位論文5人非小細(xì)胞肺癌組織中p63基因的轉(zhuǎn)錄表達水平研究摘要p53是人類腫瘤中發(fā)生變異頻率最高的抑癌基因在多種腫瘤的生物學(xué)行為中具有重要的作用p63是繼p73之后發(fā)現(xiàn)的p53基因家族又一成員人類p63基因定位于染色體3q2729區(qū)包含15個外顯子由于啟動子的變化及可變性拼接p63基因至少編碼6種蛋白質(zhì)形式這6種亞型均有一個相同的開放讀碼區(qū)當(dāng)mRNA轉(zhuǎn)錄從5’啟動子開始時編碼含有轉(zhuǎn)錄活化區(qū)的P63蛋白形式(TAp63)當(dāng)

2、轉(zhuǎn)錄從3’啟動子開始時則編碼缺乏轉(zhuǎn)錄活化區(qū)的P63蛋白形式(Np63)由于可變性拼接在合成TAp63及Np63時形成了三種不同的C末端即和p73一樣p63在人類腫瘤中很少發(fā)生突變因此p63是否是抑癌基因目前仍是研究的焦點目前研究結(jié)果初步證實p63并不是一個經(jīng)典抑癌基因p63基因的各種亞型對于p53功能和細(xì)胞凋亡的影響存在差異p63的兩種亞型在功能上存在明顯差異其中TAp63表達水平升高可以促進細(xì)胞凋亡而Np63的過表達則可抑制細(xì)胞凋亡故

3、而起到促癌基因功能本研究采用RTPCR(reversetranasePCR)方法檢測p63基因mRNA兩大亞型(TAp63及Np63)在40例人類非小細(xì)胞肺癌癌組織癌旁組織及相對應(yīng)遠(yuǎn)癌組織和10例肺良性病變肺組織中轉(zhuǎn)錄水平并用免疫組化方法檢測P63蛋白在各種肺組織中表達情況了解p63基因在人非小細(xì)胞肺癌組織中轉(zhuǎn)錄表達的規(guī)律著重探討其與非小細(xì)胞肺癌發(fā)生發(fā)展及臨床特征之間的關(guān)系實驗結(jié)果表明1.本組40例非小細(xì)胞肺癌組織中p63基因mRNA表

4、達陽性者為19例其中肺鱗癌18例(1823)細(xì)支氣管肺泡癌1例(16)其余腫瘤組織無明顯p63基因mRNA表達所有癌旁組織遠(yuǎn)癌組織及10例良性疾病肺組織中均無明顯p63基因mRNA表達鱗癌組織中p63基因mRNA表達水平明顯高于其它非小細(xì)胞肺癌組織類型(P0.05)2.在肺癌組織中表達水平升高的為Np63亞型而TAp63在各種類型腫瘤組織癌旁組織遠(yuǎn)癌組織及良性疾病肺組織中均無明顯表達3.40例NSCLC腫瘤組織中有18例P63蛋白呈陽性

5、表達其中肺鱗癌17例(1723)腺癌1例(16)其余腫瘤組織P63蛋白表達為陰性癌旁遠(yuǎn)癌肺組織以及良性疾病肺組織內(nèi)P63蛋白表達均為陰性在NSCLC腫瘤組織中P63蛋白表達率和表達強度明顯大第三軍醫(yī)大學(xué)碩士學(xué)位論文3Astudyontheexpressionofp63geneinhumannonsmallcelllungcancertissuesAbstractp63isanothermemberofthep53family.Thep6

6、3genemappingto3q2729contains15exonsencodesatleastsixdifferentproteinsduetoalternativepromoterusagealternativesplicingtheyallshareacommonopenreadingframe.ThemRNAtranscribedfromthemost5’promoterencodep63isofmscontainingatr

7、anionactivationdomain(TAp63)whiletranionfromthe3’promoterresultsinp63isofmsthatlacktheTAdomainarereferredtoasNp63.ThealternativesplicingresultsinsynthesisofTANisofmswiththreedifferentCtermini.Likep73p63israrelymutatedinh

8、umancancersmakingatumoursuppressfunctionunlikely.TheTANisofmsofp63haveopposingfunctionsoninducingcellcyclearrestapoptosis.TheoverexpressionofNp63intumourscansuppresstheapoptosisacceleratetheprolifetationoftumoursoNp63isa

9、noncogeneamplifiedinhumantumours.Reversetranasepolymerasechainreaction(RTPCR)imunohistochemicalstainingtechniquewasusedtoinvestigatethesignificanceoftheexpressionofTANisofmsofp63genein40nonsmallcelllungcarcinoma(NSCLC)ti

10、ssuesparacancertissues10benignlunglesiontissues.Tounderstthemannerofp63geneexpressioninNSCLCtoexpletherelationshipbetweenp63genetranexpressiononcogenesisdevelopmentclinicalacteristicofNSCLC.Basedonthestudywecanobtainedth

11、efollowingresults:1.Theexpressionofp63genecanbefoundin1940NSCLCtissuesincluding18squamouscellcarcinomas(1823)onebronchoalveolarcarcinoma(16).Thereisnoclearlyexpressionofp63geneinparacancerbenignlesiontissues.Theexpressio