紅棗低聚糖的HPLC分析及醇沉分離.pdf

1、紅棗是我國(guó)傳統(tǒng)的藥食兼用植物資源，其果實(shí)中含有多種營(yíng)養(yǎng)成分，其中糖類成分含量最高，除已經(jīng)比較明確的果糖、葡萄糖和蔗糖之外，低聚糖是近年紅棗中糖類成分研究的重點(diǎn)之一。本研究以紅棗為樣品，首先采用LC-MS法對(duì)其中兩種含量較高的低聚糖進(jìn)行了初步定性分析，發(fā)現(xiàn)其分別為蔗果三糖和蔗果四糖;隨后開發(fā)建立了一種同時(shí)分析5種主要糖類成分的Ca柱-HPLC法;并采用這種方法對(duì)兩個(gè)紅棗品種生長(zhǎng)中后期的變化、以及成熟期的32個(gè)品種進(jìn)行了糖類成分含量分析;最

2、后結(jié)合響應(yīng)面法優(yōu)化了紅棗中低聚糖的提取工藝，并初步探究了醇沉分離工藝。主要試驗(yàn)結(jié)果如下:
　　(1)采用HPLC-MS法從色譜保留值和質(zhì)譜解析兩方面鑒定出紅棗中含有蔗果三糖和蔗果四糖。建立了一種同時(shí)檢測(cè)蔗果四糖、蔗果三糖、蔗糖、葡萄糖和果糖5種糖類成分的HPLC分析方法。采用Ca離子柱分離，示差折光檢測(cè)器檢測(cè)，色譜條件為:色譜柱:HyperRez XP Carbohydrate Ca2+(300 mm×7.7 mm，8μm);柱溫

3、:85℃;流動(dòng)相:純凈水;流速:0.6 mL/min; Waters410示差折光檢測(cè)器，檢測(cè)器溫度:40℃;進(jìn)樣量:10 uL;定量方法:峰面積外標(biāo)法。用該方法對(duì)自然風(fēng)干以及鮮食的紅棗樣品進(jìn)行測(cè)定，5種糖分間具有良好的分離度，重復(fù)分析結(jié)果的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差在0.53％～0.83％之間，加標(biāo)回收率為95％～110％，線性范圍在0.30 mg/mL～10.0 mg/mL之間，回歸方程的相關(guān)系數(shù)r介于0.9996～0.9999，檢出限為0.20

4、 mg/mL～0.25 mg/mL之間，實(shí)現(xiàn)了在25分鐘內(nèi)同時(shí)對(duì)紅棗中5種糖類成分的分析檢測(cè)。
　　(2)采用建立的HPLC方法檢測(cè)阜平大棗和冬棗不同生長(zhǎng)時(shí)期棗果中低聚糖含量的變化;考察了在相同生長(zhǎng)環(huán)境下同時(shí)達(dá)到全紅期的32個(gè)紅棗品種低聚糖的含量。結(jié)果表明，紅棗糖類成分的總含量隨生長(zhǎng)發(fā)育呈逐漸增加的趨勢(shì)，完熟期時(shí)兩種紅棗中5種糖類成分的總含量分別達(dá)到最大值，阜平大棗為351 mg/g F.W，冬棗為412 mg/gF.W，兩種樣品

5、此時(shí)期下的總糖含量均高于各自不同時(shí)期的總糖含量。低聚糖的含量則是在果實(shí)生長(zhǎng)至完熟期時(shí)降至最低，其最高時(shí)期分別在阜平大棗的白熟期為28.5mg/g F.W，冬棗的幼果期為24.4 mg/g F.W。與此同時(shí)發(fā)現(xiàn)紅棗中低聚糖的含量在同一時(shí)期不同品種的棗果中含量差別較大，32個(gè)同時(shí)達(dá)到完熟期的紅棗品種中阜平大棗低聚糖含量最高，為14.8 mg/g F.W。探究低聚糖與單、雙糖的相關(guān)性，發(fā)現(xiàn)低聚糖的含量與蔗糖的含量有一定的正相關(guān)性，而與葡萄糖和