固定化殼聚糖酶及產(chǎn)酶細(xì)胞制備殼低聚糖的研究.pdf

1、論文對固定化殼聚糖酶以及固定化產(chǎn)酶菌株(Penicillium sp ZD—Z1)降解制備殼低聚糖進(jìn)行了研究.采用DEAE纖維素為載體,戊二醛為交聯(lián)劑,對殼聚糖酶的固定化條件、固定化酶的性質(zhì)進(jìn)行了研究,確定了交聯(lián)劑的最佳用量為100mgDEAE纖維素與5ml 5％戊二醛交聯(lián),酶與載體的最佳比例為23mg酶/g DEAE纖維素,固定化酶的最適溫度和pH分別為60℃和4.0,其米氏常數(shù)為18.87g/L;所得固定化酶活力可達(dá)1.5U/g、酶

2、活回收率可達(dá)81.3％,殼聚糖酶的在經(jīng)固定化后,最適溫度從50℃升高到60℃、最適pH從5.0下降到4.0、米氏常數(shù)從2.49g/L升高到18.87g/L,將該固定化酶重復(fù)使用十次,酶活力損失小于15％,但是該固定化酶穩(wěn)定性一般(保存半衰期約為15天).采用六種載體(聚氨酯泡沫、海藻酸鈣、海藻酸鈣/PAM、海藻酸鈣/PVA、PVA、海藻酸鈣/PVA/PAM)對Penicillium sp.ZD—Z1進(jìn)行固定化,確定了聚氨酯泡沫的固定化效

3、果最好;對聚氨酯泡沫固定化Penicillium sp ZD—Zl菌的條件、固定化菌體的性質(zhì)進(jìn)行了研究,確定了Penicillium sp ZD—Z1菌體的最佳固定化條件:載體的最佳用量為0.4g載體/50ml培養(yǎng)基、最適pH為5.0、最適培養(yǎng)溫度為31℃較游離菌體有所升高(游離菌的最適溫度為28℃,180rpm搖床下培養(yǎng)48h即可達(dá)到最佳固定化效果,菌體在經(jīng)固定化后其耐高溫性和耐熱穩(wěn)定性大大提高;在生物反應(yīng)器中連續(xù)進(jìn)行18批同時產(chǎn)酶降