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文檔簡介
1、目的:觀察吉西他濱、培美曲塞單獨(dú)用藥及不同順序聯(lián)合應(yīng)用處理外周T細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞株HUT78后,對(duì)其增殖及凋亡的影響,并初步探討其可能的細(xì)胞學(xué)機(jī)制,為臨床用藥提供實(shí)驗(yàn)學(xué)依據(jù)。
方法:1體外培養(yǎng)HUT78細(xì)胞,連續(xù)1-7天計(jì)數(shù)并繪制其生長曲線。
2 CCK-8法測定抑制率①吉西他濱、培美曲塞不同濃度單獨(dú)用藥,作用HUT78細(xì)胞24h、48h、72h后測定其抑制率。
?、诩魉麨I(IC50值)、培美曲塞(IC50值
2、)單藥分別作用HUT78細(xì)胞,連續(xù)5天測定其抑制率。
③吉西他濱、培美曲塞不同順序聯(lián)合用藥,作用HUT78細(xì)胞,72h后測定各組抑制率。
3吉西他濱、培美曲塞不同順序聯(lián)合用藥,作用HUT78細(xì)胞,72h后用AV-PI雙染法檢測各組凋亡率。
4吉西他濱、培美曲塞不同順序聯(lián)合用藥,作用HUT78細(xì)胞,72h后用流式細(xì)胞儀測定各組細(xì)胞周期分布的變化。
結(jié)果:1 HUT78細(xì)胞于第2天進(jìn)入對(duì)數(shù)生長期,第6
3、天進(jìn)入平臺(tái)期。
2 CCK-8法檢測結(jié)果:①對(duì)于HUT78細(xì)胞,單藥吉西他濱、培美曲塞作用均具有時(shí)間依賴性及濃度依賴性,隨著時(shí)間的增加,其抑制率逐漸增加,隨著濃度的增加,其抑制率逐漸增加,48h吉西他濱的IC50值為(7.50±0.71)×10-3μg/ml,培美曲塞的IC50值為(1.72±0.52)μg/ml。②吉西他濱(IC50值)、培美曲塞(IC50值)單藥作用HUT78細(xì)胞1-5天,隨著培美曲塞作用時(shí)間的增加,其抑制
4、率逐漸增加,第5天抑制率最高,為(87.18±2.01)%,而吉西他濱于第3天抑制率達(dá)到最高,為(56.76±2.56)%,隨后降低。③吉西他濱、培美曲塞不同順序聯(lián)合用藥,于72h測定各組抑制率,G組為(55.85±2.72)%,P組為(76.37±2.83)%,G+P組為(81.66±2.26)%,GP組為(61.56±2.75)%,PG組為(86.53±2.43)%。
3吉西他濱、培美曲塞不同順序聯(lián)合用藥,于72h測定各組
5、凋亡率對(duì)照組為(6.66±0.60)%,G組為(12.02±0.91)%,P組為(25.63±0.77)%,G+P組為(29.41±0.89)%,GP組為(13.90±0.49)%,PG組為(31.69±1.16)%。
4吉西他濱、培美曲塞不同順序聯(lián)合用藥,于72h測定各組細(xì)胞周期的變化:對(duì)照組S期占(26.31±0.56)%。同對(duì)照組相比,用藥后均使細(xì)胞阻滯在S期,各組S期的細(xì)胞百分比分別為:G組(32.41±0.51)%,
6、P組為(43.43±1.17)%,G+P組為(49.44±0.65)%,GP為(36.45±0.62)%,PG組為(54.32±1.09)%。
結(jié)論:1吉西他濱、培美曲塞均能抑制外周T細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞株HUT78的生長,且具有時(shí)間依賴性及濃度依賴性,單藥吉西他濱對(duì)HUT78細(xì)胞作用的持續(xù)時(shí)間短于單藥培美曲塞;
2吉西他濱、培美曲塞聯(lián)合用藥對(duì)HUT78細(xì)胞生長的影響同用藥先后順序相關(guān),先用培美曲塞后用吉西他濱或培美曲塞、
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