NOD1在肥胖糖尿病患者脂肪細(xì)胞中的表達(dá)及對(duì)胰島素抵抗的作用.pdf

1、目的
　　通過研究免疫受體核苷酸結(jié)合寡聚化結(jié)構(gòu)域蛋白1(nucleotide-bindingoligomerizationdomain-containingprotein，NOD1)在肥胖的2型糖尿病患者及肥胖的非糖尿病患者的脂肪細(xì)胞中的表達(dá)不同，及與胰島素抵抗發(fā)生的關(guān)系，進(jìn)一步證明NOD1在脂肪細(xì)胞中存在表達(dá)，NOD1介導(dǎo)的炎癥反應(yīng)可能導(dǎo)致肥胖型糖尿病患者胰島素抵抗的發(fā)生。
　　方法
　　隨機(jī)選取2012年9月至20

2、13年8月在我院普通外科病房患者共20例，其中10例肥胖2型糖尿病患者的腹部皮下脂肪細(xì)胞標(biāo)本作為實(shí)驗(yàn)組(DM組)，10例非糖尿病肥胖患者(NDM組)腹部皮下脂肪細(xì)胞為對(duì)照組，其中肥胖2型糖尿病患者(DM組)10例（男6例，女4例;平均年齡45.6±6.4歲），體重指數(shù)(BMI)31.7±1.6kg/m2，符合1999年ADA糖尿病診斷標(biāo)準(zhǔn);肥胖非糖尿病患者(NDM組)10例（男5例，女5例;平均年齡39.8±8.7歲），BMI30.8±

3、2.7kg/m2。所有入選者均無感染性疾病、未接受全身或局部糖皮質(zhì)激素、抗組胺藥物治療及免疫治療。受試者對(duì)實(shí)驗(yàn)知情同意。無菌條件下取人腹部皮下脂肪細(xì)胞，將人前脂肪細(xì)胞進(jìn)行原代培養(yǎng)，傳代后誘導(dǎo)分化為成熟的脂肪細(xì)胞，經(jīng)油紅O染色證實(shí)。采用Real-timePCR方法檢測(cè)兩組脂肪細(xì)胞受體NOD1mRNA的表達(dá)，分別加入NOD1受體激動(dòng)劑iE-DAP，利用酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)兩組細(xì)胞炎性細(xì)胞因子白細(xì)胞介素(IL)-6、IL-8及單核細(xì)胞趨化因子1

4、(MCP-1)水平，2-脫氧-[3H]-D-葡萄糖攝入法觀察基礎(chǔ)狀態(tài)和iE-DAP刺激狀態(tài)的葡萄糖攝取率。數(shù)據(jù)以(X)±s表示，采用SPSS11.5統(tǒng)計(jì)軟件處理，組間比較采用t檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　結(jié)果
　　NOD1在肥胖的糖尿病患者及肥胖的非糖尿病患者的腹部脂肪細(xì)胞中均有表達(dá);實(shí)時(shí)定量PCR顯示，與NDM組相比，DM組脂肪細(xì)胞中NOD1mRNA的表達(dá)水平顯著增高，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（2.53±0.35

5、vs.3.83±0.51，P＜0.05）;應(yīng)用濃度為100μg/ml的NOD1受體激動(dòng)劑iE-DAP分別作用NDM組和DM組脂肪細(xì)胞24h后，收集培養(yǎng)細(xì)胞上清液，經(jīng)ELISA檢測(cè)，結(jié)果顯示，與NDM相比DM組脂肪細(xì)胞炎性因子白細(xì)胞介素(IL)-6和IL-8蛋白水平顯著升高(P＜0.05)，單核細(xì)胞趨化因子1(MCP-1)蛋白水平也顯著升高(P＜0.05);以2-脫氧-[3H]-D-葡萄糖攝入法檢測(cè)脂肪細(xì)胞葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)發(fā)現(xiàn)，加入濃度為100