保護(hù)素PD1對LPS刺激人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞和中性粒細(xì)胞之間粘附性的影響.pdf

1、目的：觀察PD1 對LPS 刺激人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞（HUVECs）和中性粒細(xì)胞（PMNs） 之間粘附性的影響及其機(jī)制。
　　 方法：選擇復(fù)蘇后的3～4 代HUVECs 進(jìn)行轉(zhuǎn)板，采用BCECF-AM 熒光染料法測定PMNs-HUVECs細(xì)胞之間的粘附性。粘附性檢測實驗分為五組：對照組，LPS組，200nMPD1 預(yù)處理PMNs組（P200組），20nM PD1 預(yù)處理PMNs組（P20組），2nM PD1 預(yù)處理PMNs組（P2組

2、）。除對照組外，各組均用1ug/ml LPS 作用6h后，P200組，P20組,P2組分別加入經(jīng)200nMPD1，20nMPD1，2nMPD1 預(yù)處理的BCECF-AM 標(biāo)記的PMNs，其余兩組，加入未經(jīng)PD1 處理的BCECF-AM 標(biāo)記的PMNs，作用30min后，用熒光顯微鏡和熒光分光光度計對粘附在HUVECs 上BCECF-AM 標(biāo)記的PMNs 進(jìn)行檢測；并用流式細(xì)胞儀檢測不同濃度（2nM、20nM、200nM）PD1 對PMN

3、s表面LFA-1的表達(dá)；Western 檢測不同濃度（2nM、20nM、200nM）PD1 對HUVECs 上ICAM-1的表達(dá)。
　　 結(jié)果：與LPS組相比，P2組，P20組，P200組均使PMNs和HUVECs 之間粘附率降低（P＜0.05），并呈濃度依賴性。不同濃度的PD1 降低LFA-1(CD11a/CD18)的表達(dá)（P＜0.05），而對ICAM-1的表達(dá)有降低趨勢但是無統(tǒng)計學(xué)差異（P＞0.05）。
　　 結(jié)論：