胰島素磷脂復(fù)合物及其自微乳劑的研究.pdf

1、微乳作為口服胰島素載體，具有粒徑細(xì)小和滲透能力強(qiáng)的特點(diǎn)，可保護(hù)胰島素在胃腸道中不受酸和酶的破壞，同時(shí)可模擬食物中乳糜微粒的成分被吸收進(jìn)入淋巴系統(tǒng)。現(xiàn)有研究報(bào)道的微乳，胰島素均存在于微水相，其中O/W型微乳進(jìn)入體內(nèi)后，外水相中的藥物直接與胃腸液及生物酶接觸，易被破壞，而W/O型微乳液雖然藥物存在于內(nèi)水相，但在被胃腸液稀釋后容易發(fā)生轉(zhuǎn)相，藥物被暴露于外相中，進(jìn)而遭到降解。水/油/水(W/O/W)復(fù)乳因內(nèi)部包含大量的油包水微粒，通常粒徑較大，

2、且易發(fā)生水相之間聚合或油球聚合，導(dǎo)致油膜破裂以及內(nèi)水相外溢，貯存穩(wěn)定性較差。
　　 本文擬通過磷脂復(fù)合物制備，提高胰島素油溶性，在此基礎(chǔ)上，制備高載藥量的自微乳濃縮液，提高藥物在胃腸液中的穩(wěn)定性，改善口服后的自乳化效率，促進(jìn)藥物經(jīng)胃腸粘膜轉(zhuǎn)運(yùn)與吸收。
　　 圓二色譜法建立及影響胰島素構(gòu)象的因素考察建立了圓二色譜法用于胰島素構(gòu)象的測定，通過對遠(yuǎn)紫外二級結(jié)構(gòu)圖譜及近紫外三級結(jié)構(gòu)圖譜特征峰的考察，結(jié)合二級結(jié)構(gòu)中α螺旋構(gòu)象比例的

3、變化，系統(tǒng)考察了微粒載體制過程中涉及的高分子材料、添加劑、有機(jī)溶劑、溫度、pH值等因素對胰島素構(gòu)象的影響，為微粒載體制備條件的優(yōu)化提供依據(jù)和參考。
　　 胰島素磷脂復(fù)合物研究以含5％冰醋酸的甲醇為溶劑，溶劑揮發(fā)法制備胰島素磷脂復(fù)合物。以含量百分比及復(fù)合率為指標(biāo)，對藥物/磷脂投料比例及各種工藝參數(shù)進(jìn)行了系統(tǒng)優(yōu)化；通過皮下注射降血糖曲線考察，對胰島素磷脂復(fù)合物的生物活性進(jìn)行了驗(yàn)證。紅外光譜、圓二色譜及X-ray等鑒定結(jié)果顯示，胰島素

4、的羥基與磷脂的磷氧雙鍵發(fā)生分子間相互作用，兩者以摩爾比1∶74（重量比為1∶10）形成了磷脂復(fù)合物，胰島素由晶態(tài)轉(zhuǎn)變?yōu)闊o定形分布，聚合程度受到抑制，更多以單體形式存在。磷脂復(fù)合物的形成使胰島素在水、正辛醇及油相中的溶解度均得到大幅提高，其中，中鏈油中的溶解度由＜0.2mg/g提高到＞18mg/g以上。
　　 以胰島素磷脂復(fù)合物為中間載體的自微乳研究采用偽三元相圖，對油相、乳化劑和助乳化劑進(jìn)行系統(tǒng)篩選。以中鏈油∶Cremphor

5、RH40∶Transcutol P(20∶40∶40)為處方制備的自微乳濃縮液，胰島素載藥量可達(dá)3.62mg/g。自微乳遇水瞬間即可發(fā)生自乳化形成粒徑在50nm以下的水包油納米乳，藥物存在內(nèi)油相，至少在2小時(shí)內(nèi)乳滴穩(wěn)定。自微乳的乳化效率和乳化后的粒徑不受稀釋劑的pH值或體積影響。與胰島素水溶液相比，無論是胰島素磷脂復(fù)合物的混懸液還是含磷脂復(fù)合物的自微乳液，在含酶人工胃液和含酶人工腸液中的穩(wěn)定性均顯著提高，其中，自微乳提高幅度更大。

6、>　　 含胰島素磷脂復(fù)合物的自微乳安全性和有效性評價(jià)包含乳化劑和助乳化劑的自微乳，連續(xù)灌胃給藥14天，對小鼠胃、腸表面的微觀結(jié)構(gòu)及體重增長情況未見影響，口服安全性良好。
　　 與胰島素溶液組相比，口服含胰島素磷脂復(fù)合物的油溶液或其自微乳濃縮液，均可顯著降低糖尿病大鼠的血糖值，藥效維持時(shí)間長達(dá)5小時(shí)。與油溶液相比，自微乳經(jīng)口服吸收的量效關(guān)系更加明確，降血糖效果更好，絕對生物利用度達(dá)4.59%。
　　 綜上所述，在磷脂復(fù)合