抗內皮素A型受體抗體在狼瘡相關肺動脈高壓中的致病性研究.pdf

1、目的：探討抗內皮素A型受體抗體（ENRA-Ab）作為新的生物標記物在系統(tǒng)性紅斑狼瘡相關肺動脈高壓（SLE-PAH）中的臨床意義，并通過一系列體外、體內實驗揭示其可能的抗體介導的SLE-PAH免疫致病機理。
　　方法：重組人內皮素 A型受體(ENRA)為靶抗原，建立 ELISA檢測 SLE-PAH組（n=86）、SLE組（n=80）及正常對照組（n=60）血清中的ENRA-Ab，以正常對照組均值+3倍標準差為界值；部分接受抗 PAH

2、靶向治療的患者檢測該抗體的動態(tài)變化。通過結構模建分析合成4條ENRA的表位肽段，應用已建立的ELISA方法和內部一致性信度分析篩選肽段，建立基于抗原肽的ENRA-Ab的ELISA方法。進而分析ENRA-Ab與SLE-PAH臨床表型、嚴重性和預后的關聯?？乖?佐劑免疫動物獲得多抗IgG，體外不同條件下刺激血管平滑肌細胞(SMC)、內皮細胞(EC)，xCELLigence系統(tǒng)實時監(jiān)測SMC增殖，血管通透性試劑盒檢測內皮屏障通透性，RT-P

3、CR檢測PAH主要致病因子的轉錄表達。亞劑量野百合堿（MCT）構建PAH大鼠動物模型，尾靜脈給予ENRA-Ab IgG及對照IgG,從右心室肥厚指數、肺血管造影、病理組化觀察該抗體對PAH進展的影響。
　　結果： SLE-PAH組超過40％的患者存在ENRA-Ab，明顯高于SLE組和正常對照組。該抗體水平與SLE-PAH患者心彩超估測肺動脈收縮壓（PASP）有顯著相關性（r=0.3922,p=0.002）,部分接受抗PAH治療的患

4、者此抗體滴度下降，其水平隨病情波動而變化。ENRA-Ab與SLEDAI評分、6分鐘步行距離（6MWD）、NYHA心功能分級、腦鈉尿肽（BNP）及短期預后無顯著相關性。體外試驗證實ENRA-Ab可刺激SMC增殖，增強內皮素-1（ET-1）對SMC的增殖效應；增加血管內皮屏障的通透性；促進血管細胞表達PAH主要致病因子，且這一作用可被內皮素受體拮抗劑適當抑制。在亞劑量MCT誘導的PAH模型中，ENRA-Ab可加重大鼠右心室肥厚、肺血管閉塞，